Super DNA Ladder

库存 ：324

保质期 ：24个月

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：-20℃

规格 ：100次(500μl)|500次(5×500μl)

特别提示：包括Super DNA Ladder在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Super DNA Ladder
产品货号：WE0243
产品规格：100次(500μl)|500次(5×500μl)

  Super DNA Ladder由10条DNA片段组成，分别为10000bp、5000bp、3000bp、2000bp、1,500 bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品含有1×Loading Buffer的DNA溶液，可取5μl直接电泳，使用十分方便；电泳时1000bp的DNA片段量约为150ng，显示亮带，其他条带的DNA量约为50ng。

实验前准备及重要注意事项：
1、本产品可直接化冻混匀使用，无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶，以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时，凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大，因此尽量选用质量好的琼脂糖，推荐凝胶浓度为1%-3%，电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大，对短片段DNA分离性能越好；反之，凝胶浓度越小，越有利于长片段DNA的分离。

使用方法：
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽，大于6mm时，须适当增加上样量)，进行电泳。


1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期24个月。

除了Super DNA Ladder,，我公司还供应以下相关产品：



名称：一站式DNA尿素-PAGE电泳套装
货号：BTN90317
规格：30次
本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。

产品特点：
1.一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
3. 安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品*烯酰胺。
4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。

产品组成：

成分	规格	保存
电泳级尿素	210g	常温
电泳级*烯酰胺	77.34g	常温
电泳级甲叉双*烯酰胺	2.67g	常温
10×TBE电泳液	250ml	常温
电泳级TEMED	1.5ml	4℃，避光
电泳级过*酸铵	1g	常温
2×尿素-PAGE上样液	1ml	-20℃
说明书	1份

储存条件：常温运输，保存条件见上表，有效期一年。

使用方法：

一、PAGE浓度和交联度的选择指南
尿素-PAGE一般推荐用29：1(*烯酰胺：甲叉双*烯酰胺)的交联度，
在此条件下，DNA片段和zuì适PAGE浓度对应关系如下：

单链DNA长度	zuì佳PAGE浓度	二*苯青FF迁移率 对应的长度	溴酚蓝的迁移率 对应的长度
50-400nt	8%	160nt	45nt
200-1000nt	5%	260nt	65nt
750-2000nt	3.5%	460nt	100nt

二、制备尿素-PAGE胶
1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量，配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A：新鲜配制10%的APS(过*酸铵)：按每0.1 克过*酸铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫酸铵干粉的1.5mL EP 管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B：新鲜交联度为29:1的40%的*烯酰胺-甲叉双*烯酰胺溶液(AB溶液，下同)：在装有77.34 g电泳级*烯酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水，然后将全部甲叉双*烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量*烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双*烯酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
C：配尿素-PAGE胶：在一个250mL的三角瓶中，先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。*烯酰胺单体溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

PAGE胶浓度	各成分用量(尿素为克，其余单位是mL)			补水到(mL)
	尿素	40%AB溶液	10×TBE缓冲液
5%	42	12.5	5.0	100
6%	42	15.0	5.0	100
7%	42	17.5	5.0	100
8%	42	20.0	5.0	100
9%	42	22.5	5.0	100
10%	42	25.0	5.0	100
11%	42	27.5	5.0	100
12%	42	30.0	5.0	100

D：搅拌溶解，然后用滤纸过滤。zuì好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制*烯酰胺聚合反应)，无条件也可以不脱氧。
E：加入500μL 10%APS和100μL TEMED，迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子，用0.5×TEB液冲洗加样孔。

三、样品准备
2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品：将样品跟上样液1:1 混合，95℃ 3分钟变性，然后放冰上待用。
3. 对TGGE样品：可以直接上样。

四：电泳
4. 将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
6.连接电源线，打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热，这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压，产热都将随电泳时间而变化，不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率，大胶用15-25W 固定功率。
7. 终止电泳，取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意：如果银染，必须延长固定时间以便让洗出尿素，否则残留尿素会干扰后面的银染。