血清/血浆TaqMan microRNA反转录试剂盒

库存 ：399

英文名 ：TaqMan microRNA cDNA Synthesis Kit For Serum/Plasma Sample

保质期 ：2年

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：请置于-20℃

规格 ：25T|100T

特别提示：包括血清/血浆TaqMan microRNA反转录试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：血清/血浆TaqMan microRNA反转录试剂盒
英文名称：TaqMan microRNA cDNA Synthesis Kit For Serum/Plasma Sample
产品货号：MT0007
产品规格：25T|100T

血清/血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒采用加A法进行反转录，加A法的反转录效率远高于茎环法，因此，采用该方法可极大的提高检测灵敏度（原理见图 1）。该试剂盒操作简单，仅需要两步即可轻松完成miRNA的cDNA 合成，合成的cDNA 可用于所有 miRNA的后续定量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物进行 PCR 扩增，FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基团进行定量检测。

Biorab的血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒专用于血清血浆miRNAs分子的反转录试验（不可用于组织和细胞），转录获得的cDNA产物用于TaqMan定量PCR方法检测miRNAs分子（仅适用Biorab TaqMan miRNA定量PCR试剂盒，货号：MTTxxxxx）。


图 1：血清/血浆TaqMan miRNA 反转录试剂盒原理图

产品组成：

组分	MT0007(25T）	MT0007(100T)
5×TaqMan miRNA RT Solution A	65μl	250μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B	65μl	250μl
10×PS TaqMan miRNA RT Primer	65μl	250μl
RNase-Free H2O	1ml	1ml×2

储存：请置于-20℃，可保存2年；避免反复冻融

操作方法：
1．按以下组分在0.2ml EP管中配制应液
  血清血浆 miRNA——————————————10μl
  5×TaqMan miRNA RT Solution A——————2.5μl
2．在PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应:
  37℃—————————30分钟
  85℃—————————5分钟
3．反应完毕后，在上述12.5μl 反应体系中加入如下试剂，并混合均匀。
  10×PS TaqMan miRNA RT Primer——————2.5μl
  10×TaqMan miRNA RT Solution B——————2.5μl
  H2O 7.5μl
4．在PCR 仪上按以下条件进行反转录反应:
  30℃——————5分钟
  55℃——————60min
  95℃——————5分钟
获得的cDNA 产物可用于多个目标 miRNA的检测。通常取2μl即可用于 TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒检测(货号：MTTxxxxx)，该试剂盒有一万余种，详细列表可查询。
5．利用TaqMan qPCR Kit 对上述miRNA cDNA 产物进行 RealTime PCR 检测。
内参基因可选择使用：TaqMan hsa-miR16 miRNA 定量PCR 试剂盒(货号：MTT01511)； TaqMan cel-miR-39 miRNA 定量 PCR 试剂盒(货号：MTT01513)。

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