cirRNA荧光素酶报告检测(环状RNA)

提供商 ：莱德盟生物

服务名称 ：cirRNA(环状RNA)荧光素酶报告检测

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简介
    Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。 应用原理 本实验适用于验证circRNA sponge功能，荧光素酶报告基因实验（luciferaseAssay）是检测某个circRNA和靶标miRNA特异性结合的重要手段。

原理：
    （1）构建一个将circRNA特定片段插入到荧光素酶报告基因质粒，如psiCHECK等。
    （2）将要检测的miRNA与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此miRNA能够与circRNA结合，则荧光素酶基因就会下调，荧光素酶的表达量与miRNA-circRNA的作用强度成反比。
    （3） 加入特定的荧光素酶底物，荧光素酶与底物反应，产生荧光素，通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性，从而判断miRNA-circRNA的相互作用。

服务介绍：
    当miRNAs被 circRNA吸附，理论上细胞内miRNA的总量不会产生变化，因此无法通过qRT-PCR检测来判断miRNA是否吸附。通常只能通过预测可能被吸附的miRNA，过表达circRNA后通过检测miRNA的下游基因表达差异，间接反映circRNA sponge功能。但这种方法，不能有效说明是circRNA -miRNA直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，我公司的技术人员利用psiCHECK质粒，对miRNAs与circRNA的关系作出准确判断。




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广州莱德盟生物医学实验外包服务：
常规类：
AAV病毒包装、Westhern-blot、实时定量PCR、WB检测、细胞功能、ELISA、免疫组化、原位杂交、载体构建、慢病毒包装
特色类：
IncRNA功能研究方案、circRNA功能研究方案、microRNA功能研究方案、双萤光报告系统服务、CRISPR/cas9服务、动物实验
其它：
标书制作、博士论文辅助与指导、论文润色