人椎间盘髓核细胞培养试剂盒

品系 ：详见说明书

ATCC Number ：Human Intervertebral Disc PrimacellTM：Nucleus Pulposus Cells

细胞类型 ：详见说明书

肿瘤类型 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

库存 ：22

注册证号 ：详见说明书

英文名 ：详见说明书

生长状态 ：贴壁/悬浮

年限 ：详见说明书

运输方式 ：常温运输/干冰运输

器官来源 ：详见说明书

是否是肿瘤细胞 ：详见说明书

细胞形态 ：上皮样/成纤维样/其它

免疫类型 ：详见说明书

物种来源 ：人/小鼠/大鼠/其他

相关疾病 ：详见说明书

组织来源 ：详见说明书

规格 ：详见说明书

公司的人椎间盘髓核细胞培养试剂盒质量佳，发货速度快，售后有保证。可支持各大院校先发货
细胞描述
人椎间盘髓核细胞培养试剂盒椎间盘细胞可以合成和分泌细胞外基质成分并调控细胞外基质成分有序合理的组织，从而使椎间盘行使正常功能。其中，人椎间盘髓核细胞分离自正常人椎间盘组织，细胞多成呈短梭形、纺锤形，多角形，胞质向外伸突，传代大部分细胞演化为长梭形，生长滞缓。椎间盘髓核细胞原代培养在研究髓核细胞生物学、转基因治疗以及组织工程等方面日渐成为一种不可缺少的技术。 虽然骨组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的人椎间盘髓核细胞分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的人椎间盘髓核细胞组织片能使得骨组织中人椎间盘髓核细胞的一些功能特性发生改变，从而将人椎间盘髓核细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的椎间盘髓核细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的成骨原代细胞中成纤维细胞的含量。 人椎间盘髓核细胞培养试剂盒适合于培养人的软骨组织细胞。
本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM人椎间盘髓核细胞组织解离液 （3×1ml） （2）人椎间盘髓核细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM人椎间盘髓核细胞成纤维抑制剂（1ml（500X）） （4）人椎间盘髓核组织洗液（5 x 100 ml） （5）人椎间盘髓核细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）人椎间盘髓核细胞基础培养基（5 x 100ml） （7）人椎间盘髓核组织预备液 （1 x 100 ml） （8）人椎间盘髓核细胞培养试剂盒使用说明书
细胞传代： 
人椎间盘髓核细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏： 
1. 人椎间盘髓核细胞培养试剂盒 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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人椎间盘髓核细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短