LK204 Omni-PAGE™ 预制胶 Hepes 15%,10 wells

LK204 Omni-PAGE™ 预制胶 Hepes 15%,10 wells

价格: ¥358

品牌:雅酶 品牌认证

货号:LK204

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产品详情

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保质期 :18个月

保存条件 :4℃

规格 :10片装

Omni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris)
Omni-PAGE™Hepes-Tris Gels
本产品常温运输;4℃保存18个月。切勿置于0℃以下,以免凝胶发生冻裂。

货号规格

 
产品编号 预制胶浓度 孔数 每孔最大上样量 规格
LK201 8% 10孔 60 μL 10片装
LK202 10% 10孔 60 μL 10片装
LK203 12% 10孔 60 μL 10片装
LK204 15% 10孔 60 μL 10片装
LK205 4~15% 10孔 60 μL 10片装
LK206 4~20% 10孔 60 μL 10片装
LK207 8~20% 10孔 60 μL 10片装
LK208 8% 15孔 30 μL 10片装
LK209 10% 15孔 30 μL 10片装
LK210 12% 15孔 30 μL 10片装
LK211 15% 15孔 30 μL 10片装
LK212 4~15% 15孔 30 μL 10片装
LK213 4~20% 15孔 30 μL 10片装
LK214 8~20% 15孔 30 μL 10片装

产品组分
 
组分名称 数量
预制胶 10片
Hepes-Tris缓冲液粉剂 10(500 mL)

产品简介
goodOmni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris)是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙xi酰胺凝胶,常用PAGEWestern Blot检测。本预制胶含1.5 cm高度4%浓缩胶。丙xi酰胺与甲叉双丙xi酰胺的比例29:1,凝胶厚度1.5 mm, 加样孔数10/15孔,最大上样量60 μL/30 μL,胶板尺寸××厚度98×84×4.1 mm;凝胶尺寸为××厚度81×74×1.5 mm。

产品特点
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d稳定——采用自动化灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性;
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d条带——采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为尖锐,清晰;
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d电泳——电泳时间短,150 V电压下,电40~50 min即可完成;
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d操作便——胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开;
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d通用——凝胶中不SDS, 可用于变性和非变性电泳(需使用非变性电泳液);
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d兼容——兼容市场上主流mini电泳槽,Bio-RadInvitrogen天能和君意东方等;
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d种类——提供多种浓度的均一胶和梯度胶。均一胶可选浓度8%,10%,12%,15%。梯度胶可选浓度4~15%4~20%8~20%。

使用说明
good1. 请参考下面的分离谱图选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离;
good2. 将Omni-PAGE™预制(Hepes-Tris)从包装袋中取出,固定在电泳槽中;
good3. 准备电泳缓冲液:每盒预制胶赠10包电泳缓冲液粉末,每包粉末可500 mL纯水进行溶解,得到500 mL 1×电泳液;
goodgood1×Hepes变性胶电泳液参考组分为50 mM Tris50 mM Hepes0.1% SDS2 mM EDTApH 7.8~8.0。
good4. 将电泳缓冲注满电泳槽内槽,外槽加入电泳液没过电泳槽底部的阳极即可 
good4. 预制胶加样孔中有残留的储存缓冲液,建议1 mL移液枪吸取电泳液轻轻吹打加样孔,去除气泡和残留的储存缓冲液,以得到最佳电泳效果。
good5. 上样:将蛋白样品与5×蛋白上样缓冲液(货号LT101或LT103)4:1混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液;
good6. 电泳条件:150 V40~50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部或实验预定位置时,即可结束电泳;
good7. 电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开硅胶,即可打开玻璃板。取胶时,需在胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止发生粘连使胶破碎。

特别注意
good① 使用Bio-Rad电泳槽请按如下操作:
good① 使用Bio-Rad Mini-PROTEAN系列电泳槽的U型密封条顶部有突起结构,而Omni-PAGE系列预制胶因其短玻板是凹形结构,该部位是平的,因此电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反安装,使面朝外,从而防止漏(如下图所示)。具体操作如下:

good① a. 将Bio-Rad电泳槽中的U型密封(如图绿色部分)拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的一面为正面,无突起的为反面;

 

good① b将密封条旋转180°(面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液;

good① c放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。
 
good 使用Life Technology Novex电泳槽请按如下操作:
good 使用由于雅酶Omni-PAGE系列预制胶Invitrogen NuPAGE预制胶略薄,所以需要特制的挡板,使得该系列预制胶能够适用Life Technology Novex电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知,雅酶会免费赠送该特制挡板。

分离图谱(蛋白条带分子量单位kDa)

注意事项
good1. Omni-PAGE预制(Hepes-Tris)使用的是中性Hepes缓冲系统,请勿使Tris-Glycine等其它电泳缓冲液进行电泳;
good2. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100~120 V,适当延长电泳时间;
good3. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果;
good4. 电泳结束后可以使用Tris-Glycine转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液10~15 min, 使凝胶中的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜;
good5. 上样时移液器吸头不要过度插入点样孔,以免戳破凝胶造成漏液;
good6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good7. 本产品仅限科研使用。

常见问题
good1. 蛋白电泳示踪染料溴酚蓝扭曲、电泳时间大幅度延长:
good1. ● 可能是内槽缓冲液泄漏导致。建议重新夹胶板,防止在电泳过程中内槽液面逐步降低;

good2. 使用自己配制的其它体系电泳缓冲液电泳后条带较模糊:
good1. ● 本预制胶为中性,对电泳缓冲液的要求比传pH 8.8的分离胶要高,缓冲液配制不当,或长期放置变质, 都会对本预制胶的蛋白电泳效果产生影响;

good3. 电压为150 V电泳时,一块胶的电流80 mA左右,2块胶的电流140 mA左右,随着时间增加电流会逐步降低。如果电流明显不在这一范围,需检查电泳液的质量,电极是否插反及内槽电泳液是否有漏液现象;

good4. 湿转时,需120 V恒压转60~90 min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的膜上的预染蛋白分子量标准确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。蛋白分子100 kDa以上,建议甲醇浓5%;10~100 kDa建议甲醇浓10%;10 kDa以下,建议甲醇浓20%~30%;

good5. 电泳时泳道拖尾严重,点样孔样品滞留明显:
good1. ● 可能原因是样品处理不充分:
good1. ● a. 裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度,或增加裂解液的比例,使样品充分裂解;
good1. ● b. 上样缓冲液处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后,再进行上样缓冲液处理;

good6. 蛋白条带中间凹陷,两边突起:
good1. ● 可能原因是样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高。建议稀释样品或对样品进行透析后,再进行上样缓冲液处理和上样。


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