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文献和实验
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库存 :142
英文名 :PBR322 plasmid
保质期 :长期
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :20ug
特别提示:包括PBR322载体在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PBR322载体
英文名称:PBR322 plasmid
产品货号:QN1048
产品规格:20ug
质粒载体pBR322是研究得zuì多,使用zuì早且应用zuì广泛的大肠杆菌质粒载体之一。符号质粒载体pBR322中的“p代表质粒;“BR”代表两位两位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字首,“322”是实验编号。 pBR322是一个人工构建的重要质粒,有万能质粒之称。它是由pSF2124、pMB8及pSC101三个亲本质粒经复杂的重组过程构建而成的。本产品为纯化的PBR322质粒溶于TE缓冲液,可直接用于载体构建、转化等分子克隆实验操作。
质粒载体pBR322的大小为4361bp,相对分子质量较小的是它第一个优点。优点之二是它带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的功能。具有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因两种抗生素抗性基因,可供转化子的选择标记是它的第三个优点。
储存条件:-20℃
除了PBR322载体,,我公司还供应以下相关产品:
名称:即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)
货号:BTN120514
规格:20次
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5′都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
产品特点:
1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3. 插入位点两侧有多克隆(CMS)位点,便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
4. 来源于pUC19质粒,两侧无RNA聚合酶启动子。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
产品组成:
组分 | 规格 |
即用型蓝白T载体D型(10ng/μL) | 60μl |
阳性对照(35ng/μl) | 30μl |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
质粒图谱
多克隆位点
名称:X-gal溶液
货号:BTN80910
规格:10mL
本产品为浓度为20mg/mL的无色液体。X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶的底物,水解后呈现蓝色。其原理如下:
由于许多常用的克隆质粒载体的多克隆位点都是通过定点诱变的方法被安置在lacZ基因中,所以如果在培养基中加入IPTG诱导剂和X-Gal,则就可以根据菌落的颜色判断菌落中质粒是否携带插入片段(克隆成功与否)。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
名称:硫酸庆大霉素
货号:BTN120692
规格:2mL
本产品为浓度为15mg/mL的硫酸庆大霉素溶液。有效浓度为5μg/mL,在大于300μg/mL时具备细胞毒性,推荐使用终浓度:0.5-50μg/mL;WHO推荐在鼻咽拭子样本处理中使用终浓度为10㎎/mL。硫酸庆大霉素又叫庆大霉素硫酸盐,分子式:C21H43N5O7·H2SO4,分子量:575.67,CAS号:1405-41-0。溶于水。
作用原理:庆大霉素靠结合到30S核糖体亚单位上引起密码读错,阻断肽酰-tRNA(peptidyltRNA)从受体位点到供体点点的转移。庆大霉素对假单胞杆菌的杀菌效果靠结合到细胞膜的外膜部分,置换本来存在的阳离子,使膜不稳定,在细胞表面形成空洞。抗菌谱: 革兰氏阴性细菌,葡萄状球菌和其它的革兰氏阳性细菌。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
名称:pGL6-TA报告基因质粒
货号:YT443
规格:1μg
pGL6-TA报告基因质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到zuì低。
pGL6-TA主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。pGL6-TA和pGL6相比在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter,使luc基因的基础转录水平提高。
pGL6-TA质粒的主要信息如下:
Base pairs | 5629 |
Multiple cloning region | 1-59 |
Minimal TA promoter (pTA) | 66-88 |
luc2 reporter gene | 120-1782 |
SV40 late poly(A) signal | 1817-2038 |
SV40 early enhancer/promoter | 2086-2504 |
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region | 2529-3323 |
Synthetic poly(A) signal | 3348-3396 |
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3463-3482 |
ColE1-derived plasmid replication origin | 3720 |
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4511-5371 |
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5476-5629 |
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5578-5597 |
pGL6-TA质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列:在多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。pGL6-TA也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6-TA质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
储存条件:-20℃。
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