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规格 :1ml
1. 概述蛋白质磷酸化参与多种细胞过程,约30%蛋白可实现磷酸化修饰。很多研究聚焦于蛋白的翻译后修饰。然而,因磷酸化肽丰度低、化学计量低和理化特性特殊等因素,导致长期以来蛋白质组尺度上的磷酸化研究都是蛋白质组学研究的一个重要挑战。因此,当前迫切需要能特异富集磷酸化肽、且与质谱分析兼容的富集技术。
二氧化钛具有富集磷酸丝氨酸(pSer)、磷酸苏氨酸(pThr)和磷酸酪氨酸(pTyr)残基的选择性亲和力。TiO2-功能性磁珠(PuriMag Si-TiO2)是一种专有的磁性材料微粒载体,能在复杂生物样品的蛋白消化物中简单、方便、高效、高特异、高重复性富集磷酸化肽。磁珠表面的二氧化钛纳米粒子对于单磷酸化肽和多磷酸化肽没有明显的偏好,因而非常适合单步富集磷酸化肽用于基于质谱的蛋白质组学分析。PuriMag Si-TiO2以其出色的特异性,超越竞争对手的产品,具有较高的磷酸化肽回收率。PuriMag Si-TiO2技术的优势如下:
l 对磷酸化肽高特异性;
l 对单磷酸化肽和多磷酸化肽无明显的偏好;
l 小于10s的快速磁响应性,减少样品损失,更适合自动化操作;
l 抗氧化特性,降低样品被污染风险。
2. 产品信息
名称 | PuriMag Si-TiO2 | 用途 | 分离富集磷酸化肽 |
磁核 | 四氧化三铁 | 表面聚合物 | 二氧化硅 |
表面功能基团 | 二氧化钛(TiO2) | 结合容量 | >10 µg phosphopeptides /mg bead |
尺寸 | ~400 nm | 浓度 | 25 mg/ml,保存于20% 乙醇 |
稳定性 | pH 2.5–12; 4–60℃ | 储存 | 4–8℃,避免冷冻 |
上样缓冲液(Loading buffer): 1 M glycolic acid in 80% acetonitrile (ACN) and 5% trifluoroacetic acid (TFA) ;
洗涤缓冲液(Wash buffer): 80% ACN, 1% TFA ;
洗脱缓冲液(Elution buffer): 1% NH4OH;
影响磷酸肽结合的因素包括:缓冲液的组成、pH值以及是否存在污染物/干扰化合物。磁珠使用量应根据应用进行优化,建议使用过量的含磷酸肽样品使磁珠饱和。
注意:为确保最佳性能,所有的试剂应为分析级新鲜配制。后续的操作流程所使用的缓冲液仅作为示例,并非限制。PuriMag Si-TiO2磁珠在磷酸肽富集过程中与一系列不同的缓冲液兼容。为达到最好的纯度和产量,应优化的具体富集过程的实验条件。
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