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规格 :25ml/250ml
产品描述:
SUPERGROW®细胞培养添加物是一种适用于淋巴细胞体外培养的血清替代物,富含大量生长因子、细胞因子和蛋白,是细胞扩增培养的天然营养物。本产品不含异源动物成分,批间质量稳定,搭配各种无血清培养基可用于培养DC、CIK、NK、CTL等各种细胞,使用时按照一定的浓度比例加入培养基并混合。
使用方法:
培养细胞时,将SGR-SM按照2.5%的浓度(可依据下表)加入无血清培养基(如L500、L100、X-VIVO 15、AIM-V、GTT551等)混合后使用。2.5%浓度 | ||
培养基总体积/mL | 培养基/mL | SGR-SM/mL |
100 | 97.5 | 2.5 |
500 | 487.5 | 12.5 |
1000 | 975 | 25 |
培养基配制方法(以配制 1000mL 无血清培养基为例):
- 准备 975mL 的无血清培养基,恢复到室温。
- 准备 25mL 的 SGR-SM,4 度过夜解冻或者 37 度水浴解冻;3400g 离心 5
- 将离心或过滤后的 25mL SGR-SM 加入 975mL 无血清培养基,即可得到5%浓度的完全培养基。
- 配置好的 SUPERGROW 完全培养基可于 2℃-8℃避光保存 1 个月。
细胞培养方法(以 CIK 培养为例):
- 配制 7 天用量的含有 2.5% SGR-SM 的完全培养基备用(50mL 血样需准备约 200mL 完全培养基)。
- 使用完全培养基将分离获得的 PBMCs 按 2-2.5×106 个/mL 的浓度接种于T75 或 T175 细胞培养瓶中,加入 1000 U/mL 的重组人 IFN-γ,37℃,5%CO2 培养箱中培养。
- 24hr 后,即第 1 天加入 100ng/mL 的 CD3 单抗、1ng/mL 的重组人 IL-1α、1000 IU/mL 的重组人 IL-2,刺激 CIK 细胞的生长和增殖。
- 从第 7 天开始(或培养体积大于 200mL 时),培养基可换回不添加 SGR-SM 的无血清培养基继续培养(含 1000IU/mL 的重组人 IL-2),根据细胞培养悬液体积选择扩瓶或转入细胞培养袋。
保存方法:
-20℃~-80℃,避光保存,保质期 12 个月。上海觅拓生物科技有限公司
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金牌会员
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