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产品货号:ARL0020SKT 保存温度:-20℃ 18个月
产品介绍:
本试剂盒用于检测生物素标记效果,其原理是生物素标记在蛋白上之后,可以随蛋白吸附在酶标板上,链霉亲和素HRP(简称SA-HRP)是链霉亲和素与HRP偶联的复合物,链霉亲和素可以与生物素特异性结合反应,HRP可以催化TMB底物显色;生物素标记效率越高,其结合的SA-HRP就越多,催化TMB显色就越深。
试剂盒的准备:
除了本试剂盒中准备的试剂外,你还需准备去离子水,移液器和吸头,加样皿,离心管等。
操作步骤:
1.将生物素标记产物按照1ug/ml开始,1:2用包被缓冲液连续倍比稀释,每个稀释度100ul/孔加入酶标板中,覆膜4℃过夜。【根据实际情况,建议每个稀释度做复孔,联系做10个稀释度】
2.第二天丢弃酶标板中包被液,在吸水纸上拍干,加入封闭缓冲液150ul/孔,覆膜37℃ 60min。
3.弃酶标板中封闭缓冲液,在吸水纸上拍干,加入350ul/孔洗涤液【使用前15min用去离子水将洗涤母液(25X)稀释为1X工作液】,静置30s,弃液,重复清洗3次。
4.加入SA-HRP工作液100ul/孔到酶标板中,覆膜37℃ 60min。
5. 弃酶标板孔液,在吸水纸上拍干,加入洗涤液350ul/孔,静置30s,弃液,重复清洗3次。
6.加入100ul/孔TMB显色液,避光显色5-10min (此时颜色变蓝)。
【如果实验室没有酶标仪,可以直接肉眼观测。】
7.加入100ul/孔反应终止液终止显色(此时颜色变黄),酶标仪读数。
*本试剂仅供实验室研究使用
组分名称 | 数量 |
酶标板(96孔) | 1块 |
包被缓冲液 | 30ml |
封闭缓冲液 | 35ml |
洗涤母液(25X) | 20ml |
SA-HRP工作液 | 22ml |
酶标板覆膜 | 3张 |
TMB底物液 | 22ml |
底物终止液 | 22ml |
产品说明书 | 1份 |
本试剂盒用于检测生物素标记效果,其原理是生物素标记在蛋白上之后,可以随蛋白吸附在酶标板上,链霉亲和素HRP(简称SA-HRP)是链霉亲和素与HRP偶联的复合物,链霉亲和素可以与生物素特异性结合反应,HRP可以催化TMB底物显色;生物素标记效率越高,其结合的SA-HRP就越多,催化TMB显色就越深。
试剂盒的准备:
除了本试剂盒中准备的试剂外,你还需准备去离子水,移液器和吸头,加样皿,离心管等。
操作步骤:
1.将生物素标记产物按照1ug/ml开始,1:2用包被缓冲液连续倍比稀释,每个稀释度100ul/孔加入酶标板中,覆膜4℃过夜。【根据实际情况,建议每个稀释度做复孔,联系做10个稀释度】
2.第二天丢弃酶标板中包被液,在吸水纸上拍干,加入封闭缓冲液150ul/孔,覆膜37℃ 60min。
3.弃酶标板中封闭缓冲液,在吸水纸上拍干,加入350ul/孔洗涤液【使用前15min用去离子水将洗涤母液(25X)稀释为1X工作液】,静置30s,弃液,重复清洗3次。
4.加入SA-HRP工作液100ul/孔到酶标板中,覆膜37℃ 60min。
5. 弃酶标板孔液,在吸水纸上拍干,加入洗涤液350ul/孔,静置30s,弃液,重复清洗3次。
6.加入100ul/孔TMB显色液,避光显色5-10min (此时颜色变蓝)。
【如果实验室没有酶标仪,可以直接肉眼观测。】
7.加入100ul/孔反应终止液终止显色(此时颜色变黄),酶标仪读数。
*本试剂仅供实验室研究使用
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