ZJ101L BCA蛋白定量试剂盒

规格 ：2500次（微孔）

BCA蛋白定量试剂盒
BCA Protein Assay Kit
本产品冰袋运输； BSA标准品 -20℃保存，其它组分4℃保存，保质期12个月。

货号规格
goodZJ101L       500次(微孔)
goodZJ101L       500次(微孔)×5

产品内容
 

组分	ZJ101	ZJ101L
试剂A	100 mL	100 mL×5
试剂B	3 mL	3 mL×5
BSA标准品(5mg/mL)	1 mL	1 mL×5

产品特点
g d准确性高——变异系数远小于考马斯亮蓝染色法；
g d线性范围宽——灵敏，检测范围：20~2,000 μg/mL；
g d兼容性好——与金属离子、还原剂、螯合剂及去污剂兼容性较好。

产品简介
goodBCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu²⁺络合生成络合物，同时将Cu²⁺还原成Cu⁺，BCA试剂可敏感特异地与Cu⁺结合，形成稳定的有颜色的复合物，其在562 nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为20~2,000 μg/mL。

使用说明
good◈以微孔酶标仪法为例： 注意：为方便起见，也可以用0.9%生理盐水或PBS缓冲液稀释标准品。
gooddd3. 定量检测 
gooddd3. （1）将稀释后的标准品按0，1，2，4，6，8，10，15，20 μL分别加到96孔板中，加入用于稀释标准品的溶液补足到20 μL(为避免枪尖损失，可先补足稀释液后加入标准品)；
 

		孔号	1	2	3	4	5	6	7	8	9
		稀释后的标准品(μL)	0	1	2	4	6	8	10	15	20
		稀释液(μL)	20	19	18	16	14	12	10	5	0
		BSA终浓度(μg/mL)	0	100	200	400	600	800	1000	1500	2000

gooddd3. （2）将样品适当稀释(可以多作几个梯度，如2倍、4倍、8倍稀释)，加20 μL到96孔板的样品孔中；
gooddd3. （3）各孔加入200 μL显色工作液，充分混匀，盖上96孔板盖，37℃孵育30 min，冷却至室温；
gooddd3. （3）注意：也可以室温放置2 h，或60℃放置30 min。BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果蛋白浓度较低，可在较高温度孵育，或延长孵育时间。
gooddd3. （4）用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A562，或540~590 nm之间的其它波长的吸光度，注意要减去空白对照(稀释液＋工作液)的吸光度。
gooddd3. （5）绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
gooddd3. （3）注意：数据处理时需要去除明显错误的值。待测样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线，可以从计算机给出的线性方程式计算出待测样品的浓度。

注意事项

干扰物质附表
 

化合物	耐受浓度	化合物	耐受浓度
缓冲液		去垢剂和变性剂
乙酸盐	0.2 M	Brij35	1%
甘氨酸	1 M	CHAPS	1%
HEPES	0.1 M	盐酸胍	4 M
MES	50 mM	NP-40	1%
MOPS	50 mM	辛葡糖	1%
柠檬酸钠	<1 mM	SDS	1%
PIPES	50 mM	Triton X-100	1%
磷酸钠	0.1 M	糖类
乙酸钠	0.2 M pH5.5	葡萄糖	10 mM
TES	50 mM	蔗糖	1 M
Tris	0.1 M	螯合剂
盐类		EDTA	10 mM
硫酸铵	干扰	还原剂
NaCl	1 M	β-巯基乙醇	50 μM
尿素	3 M	DTT	1 mM
极性化合物		其它
DMSO	5%	HCl/NaOH	0.1 M
甘油	10%	脂类	干扰

相关论文