PC201plus 柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒（含蛋白酶抑制剂混合液）

保质期 ：一年

保存条件 ：天然裂解液储存于 4℃，蛋白酶抑制抑混合物储存于-20℃，其它组分储存于常温

规格 ：50次

柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
Column Tissue&Cell Protein Extraction Kit
本产品常温运输( 蛋白酶抑制剂混合液 需冰袋运输)；变性裂解液 及 天然裂解液 储存于4℃，蛋白酶抑制剂混合液 储存于-20℃，其它组分储存于常温。保质期12个月。

货号规格
goodPC201plus   50次
goodPC201plus   50次(含蛋白酶抑制剂混合液) 

产品内容
 

组分名称	PC201	PC201plus
变性裂解液	25 mL	25 mL
天然裂解液	25 mL	25 mL
蛋白酶抑制剂混合液	无	500 μL
纯化柱	50个	50个
收集管	50个	50个
塑料研磨棒	4根	4根

产品特点
gd操作简单快速——最快1 min即可得到变性总蛋白；
gd无蛋白丢失——可打开DNA双链，高效获取与DNA结合的蛋白；
gd小样本量、高得率——最小可处理20 μL样本与裂解液混合物，提取的蛋白溶液浓度可达2~8 mg/mL；
gd适用多种实验——含有两种裂解液，既可用于提取变性蛋白质，也可提取天然蛋白质。

产品简介
good本试剂盒创新性地采用过柱纯化的方法，能够快速、温和、高效地裂解动物组织或细胞，有效提取总蛋白。试剂盒同时提供变性和天然两种裂解液，用户可根据下游实验需求进行选择。整个提取过程仅需要1~8 min，由于采用过柱纯化技术，最小可处理20 μL样本与裂解液混合物，最大可达500 μL，提取的蛋白溶液浓度可达2~8 mg/mL，并可有效避免蛋白丢失。所提蛋白可采用BCA法进行蛋白定量分析(货号：ZJ101或ZJ102)，但不宜使用 Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒(货号：ZJ103)。 

使用说明
goodA. 提取变性总蛋白 goodgood2a. 贴壁细胞：将预冷的1×PBS(货号：PS110)直接加入培养板、培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞，吸去上清。按照附表(文末)中将相应体积的 变性裂解液 均匀地加入整个器皿表面，用移液器吹打几次；
goodgood2b. 悬浮细胞：低速离心收集细胞，在1.5 mL离心管中加入预冷的1×PBS，涡旋震荡，3,000 rpm离心2~3 min清洗细胞。吸去多余上清，留下与细胞相同体积的PBS，涡旋震荡重悬细胞。加入附表中相应体积的 变性裂解液 ，涡旋震荡裂解细胞；
goodgood注意：部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果。
goodgood2c. 组织样本：将15~20 mg组织放置于纯化柱上，用塑料研磨棒扭转研磨50~60次，加入200 μL 变性裂解液 ，继续研磨30~60次。如果组织样本起始量较大或者较小，需按比例调整相应裂解液的用量；
goodgood注意：塑料研磨棒可以重复使用，用蒸馏水彻底冲洗干净，用纸巾擦干。 goodgood3a. 贴壁细胞或悬浮细胞：将裂解后的细胞转移到预冷的纯化柱套管中，14,000~16,000 rpm离心30 s取出；
goodgood3b. 组织样本：盖上纯化柱盖子室温孵育1~2 min，14,000~16,000 rpm离心1~2 min取出；   goodgood2a. 贴壁细胞：将预冷的1×PBS(货号：PS110)直接加入培养板，培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞，吸去上清。按照附表中将相应体积的 天然裂解液 均匀地加入整个器皿表面，放置于冰上孵育3~5 min，用移液器吹打几次；
goodgood2b. 悬浮细胞：低速离心收集细胞，在1.5 mL离心管中加入预冷的1×PBS，涡旋震荡，3,000 rpm离心2~3 min清洗细胞。吸去多余上清，留下与细胞相同体积的PBS，涡旋震荡重悬细胞。加入附表中相应体积的 天然裂解液 ，涡旋震荡裂解细胞15 s。将离心管放置于冰上3~5 min，然后涡旋震荡10 s；
goodgood注意：①部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果；
goodgood注意：②加入裂解液后，如果细胞裂解物太过粘稠，无法用200~1,000 µL吸头吹打，可将细胞裂解物直接倒入倒入纯化柱中，进行后续操作。
goodgood2c. 组织样本：将15~20 mg组织放置于纯化柱上，用塑料研磨棒扭转研磨50~60次，加入200 μL 天然裂解液 ，继续研磨30~60次。如果起始量较大或者较小，需调整相应裂解液的用量比例；
goodgood注意：塑料研磨棒可以重复使用，用蒸馏水彻底冲洗干净，用纸巾擦干。 goodgood3a. 贴壁细胞或悬浮细胞：将裂解后的细胞转移到预冷的纯化柱套管中，14,000~16,000 rpm离心30 s取出；
goodgood3b. 组织样本：开盖冰上孵育5 min，盖上纯化柱盖子，4℃，14,000~16,000 rpm离心1~2 min取出；

细胞数量(×106)	裂解液(μL)
0.3	20
0.5	50
1	100
2	200
3	500

注意事项
good1. 若使用本试剂盒裂解液裂解样本所得产物比较粘稠，此为正常现象；
good2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good3. 本产品仅限科研使用。

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