产品详情
文献和实验
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免疫原 :详见说明书
亚型 :IgG
形态 :Lyophilized or Liquid
保存条件 :避光-20℃,保存一年
克隆性 :详询
标记物 :详询(烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体)
适应物种 :h,R,m,r
保质期 :一年
抗原来源 :Polypeptide
目录编号 :XY-KT-3308
级别 :生产厂家
库存 :100
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
宿主 :Rabbit,mouse
应用范围 :ih
浓度 :1mg/ml
靶点 :详见说明书
抗体英文名 :Hepatic Lipase
抗体名 :Hepatic Lipase
规格 :100-200ul
中文名称:Hepatic Lipase抗体[产品简介]
下面是我公司为研究者们总结出的Hepatic Lipase抗体实验遇到的常见问题
FISH常见问题
消化不足
表现:细胞成块,没有清楚的边界;信号弱,可见细胞间连接物。解决:检查酶溶液的温度并增加消化时间;检查预处理液的温度并增加预处理的时间。过消化
表现:没有清楚的细胞边界,细胞形态被破坏;可能有弱的或缺失的信号;荧光背景高。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
过预处理
表现:没有清楚的细胞边界,具不规则的细胞形态;可能有弱的或缺失的信号。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。杂交时间不当
表现:形态正常、信号弱;解决:增加杂交时间;检查探针量;检查杂交后洗脱条件。背景高
原因:杂交后洗脱不充分。解决:检查洗脱液的温度。信号强度变化
原因:由于气泡造成的探针不均匀分布。解决:重复实验并确认杂交期间盖玻片下无气泡;在探针混合物的第一接触面加盖盖玻片。组织掉片或组织形态分解
原因:组织固定不足;使用不恰当的玻片;不正确的烤片;移除盖玻片时组织被撕掉;过消化;过预处理。解决:校验固定条件;使用正确的玻片;校验烤片条件;泡更长的时间使盖玻片脱落。过变性
表现:线状信号。解决:检查变性的时间和温度。无/弱信号
可能的原因 | 推荐的解决方案 |
未添加探针(别笑,特别是探针和杂交缓冲液分开的非预混情况) | 探针充分解冻,确保移液器吸取到探针试剂。 |
探针、杂交缓冲液使用前没有充分混匀(非预混探针) | 吹打探针混合液,使探针充分混匀,短暂离心。 |
探针添加数量不足 | 确保移液器吸取准确,探针加入量足量,请不要稀释探针(包括预混和非预混)。 使用前确保探针解冻充分并达到室温。 |
标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
杂交条件不合适 | 确保遵守杂交所规定的时间和温度。 橡皮胶封片时勿留缝隙。 根据情况,调整杂交时间(跨度一般较大)和湿度。 |
杂交时盖玻片下有气泡形成 | 放盖玻片时要覆盖探针表面,轻轻挤压以便挤出气泡。 |
玻片干燥不充分 | 探针滴加至玻片前,确保玻片上的乙醇溶液已经完全挥发。 |
探针干燥太快 | 探针滴加后应立即将盖玻片覆盖目标区域。 进行洗脱时,一次只能移除一张玻片上的盖玻片,并且在移除下一张之前立即将玻片浸入洗脱液中。 |
洗脱液或洗脱条件不正确 | 确保按照产品说明书要求配制洗脱液(生产商提供洗脱液的除外)。 确保洗脱液的温度达到洗脱步骤所规定温度。 玻片浸入洗脱液前移去盖玻片。 |
探针或标本玻片储存不正确 | 确保探针-20℃避光保存。 将未杂交玻片干燥后置于-20℃长期保存或者室温短期保存(一般不超过两星期)。 将杂交后玻片置于-20℃避光保存。 |
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