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文献和实验
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库存 :现货
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
检测限 :详见说明书
检测方法 :酶联免疫
应用 :科研实验
适应物种 :猪
标记物 :详询
样本 :详见说明书
规格 :48T/96T
猪载脂蛋白E(Apo-E)检测试剂盒相关原理及注意事项:ELISA原理及流程
猪载脂蛋白E(Apo-E)检测试剂盒(双抗夹心法)
ELISA-详细步骤
ELISA 样本的处理
ELISA 检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析的实验依据。为了保证实验数据 的可靠性, 在实验过程中必须坚持全面和全程的质量控制。 并且在收集标本前都必须有一 个完整的计划。
注意事项:
1)每个标本量收集体积=100ul ×检测种类,如要做复孔,标本量收集体积=100ul ×检测 种类×2 。
2)对于作某一个具体指标来说,最好先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意 义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个最适稀释度测定即可。
3)收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存 在 4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2-8 ℃可保存 48 小时, -20 ℃可保存 1 个月。-70℃ 可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
- 血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质, 以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
- 为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。 最好使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响 检测结果。尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温 (尤其是夏季)中久置后尿中的磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。
- 标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会产生假阳性 反应。保存过久可发生聚合在 ELISA 中可使本底加深。
- 冻结标本融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分轻缓混匀,避免气泡,可上下颠 倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
- 混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
- 反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也 可加入适当防腐剂。
- 如果您在实验中遇到任何特殊问题,敬请咨询我司技术。
标本类型
ELISA 常见的标本一般包括:
液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
标本的保存
1)一般说来,在 5 天内测定的标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冻存。
2)对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。
3)标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部 分标本也可加入适当防腐剂,激素类标本需添加抑肽酶。
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