CAS号：详询

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

库存：100

英文名：rhBMP-2/BMP2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2;rhBMP-2)

生长状态：详询

年限：详询

运输方式：低温运输

规格：20

{概述}
产品名称：重组人骨形态发生蛋白-2
蛋白长度：详询
来    源：详见说明书
偶联物：详询
应    用：详见说明书
浓    度：1mg/ml
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请务必查看说明书，获取具体的保存建议。我们不对保存不当的抗体负任何责任。如果保存和处理得当，大部分抗体的活性都可保留数月，甚至若干年。

产品图片：

以下是我司研究员整理的建议希望能帮到您
为了防止微生物污染，可将NaN3加入抗体制备物中，NaN3的最终浓度为 0.02% (w/v)。我们的多款抗体中都含有这种保护剂，其浓度范围为 0.02%-0.05%。数据表的保存缓冲液部分将对此进行说明。
不使用NaN3的情况
如果要用抗体对活细胞进行染色或处理，或者要用抗体进行体内研究，请务必使用不含NaN3的制备物。这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用：它会阻断细胞色素电子传递系统。
NaN3会干扰涉及胺基的所有偶联反应，因此必须在进行偶联反应之前将其去除。完成偶联反应之后，可使用NaN3保存抗体。另一种可用的抗菌剂是 0.01% （硫柳汞），这种物质不含伯胺。
抗体溶液中的NaN3可通过渗析或凝胶过滤去除。IgG 的分子量为 150,000 Da（IgM 约为 600,000 Da），NaN3的分子量为 65 Da。截留分子量为 14,000 Da 的微渗析装置可使叠氮化物顺利扩散出去，而抗体得以保留。
渗析过程在烧杯中（置于磁力搅拌器上，温度保持 4 ℃）进行，每毫升抗体使用至少 1 升预冷的 PBS，搅拌渗析装置 6 小时。更换 PBS 两次，每次更换后均搅拌至少 6 小时。如有可能，所有材料都应灭菌，并且应在无菌条件下处理所得制备物。

去除NaN3的实验方案

将NaN3从抗体溶液中去除的具体步骤
NaN3是一种用于抑制污染物（如细菌或真菌）生长的防腐剂。然而，它在抗体溶液中的存在会影响细胞培养过程中抗原抗体的使用，因为它有细胞毒性。它还会干扰抗体和偶联物的偶联，以及抑制辣根过氧化物酶的活性。
下面的三个步骤可以用来除去NaN3。

1.透析

一个透析装置可以用来将0.1毫升到70毫升的样品中的NaN3去除。这是一种半透膜，可以选择较宽范围的不同大小尺寸和孔径大小。使用一个孔径大小可以截留10-30kDa大小以上物质的膜将允许叠氮化物通过膜，但在溶液中将保留抗体和其他蛋白。
2.脱盐
该步骤适用于体积较小的1-3毫升，脱盐柱有尺寸排阻性，由具有一定孔隙大小的小颗粒组成。
尺寸排阻是一种根据分子量来分离溶液中分子的方法。不同分子量的粒子将以不同速率通过尺寸排阻基质洗脱下来。例如，大分子不能进入基质的孔隙，因此首先被洗脱下来，而较小的分子则会渗入珠子而最后才被洗脱下来。
Sephadex G25色谱柱系统或等效的装置能有效地从抗体样品中去除NaN3。预包装的Sephadex离心柱是现成的，可用于此过程。

3.抗体纯化试剂盒

商业化的抗体纯化试剂盒也可被用于除去NaN3。

抗体修复方法：

方法1：沸水浴修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境，保持外部沸腾状态15min，自然冷却至室温；
方法2：微波修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷却至室温。

抗原修复方法：
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片需要抗原修复。
福尔马林固定的组织有可能破坏了原来组织的抗原结构，蛋白多肽发生交联，导致部分抗原表位封闭，结合位点减少，所以需要抗原修复，以暴露原来的抗原表位，达到充分显露抗原，以不出现明显脱片现象为佳。
抗原修复的几种常用方法（供参考）
1、微波炉加热：
在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液（pH6.0）至沸腾后将组织芯片放入，断电，间隔5-10分钟，反复1-2次。根据玻片情况可参考采用微波加热“3-5-3法”3分钟温火沸腾后静止5分钟，再温火沸腾3分钟即可。
适用的抗原：来源于人、大鼠、小鼠的组织标本；来源于其他动物种属的组织标本。
2、沸热修复：
电炉或水浴锅加热0.01M枸橼酸钠缓冲液（pH6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10-15分钟。
3、高压热修复：
在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）.盖上不锈钢锅盖，但不能锁定。将玻片置于金属染色架上，缓慢加压，使玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后除去热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。（骨及软骨组织的标本最好选择较温和的微波加热修复）。
4、酶消化方法：
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热37℃，消化时间约为5-30分钟。
适用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。

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