kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒

库存 ：298

英文名 ：Immunol Fluorescence Staining Kit with kFluor647-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG

保质期 ：6个月

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

规格 ：300T

特别提示：包括kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒
英文名称：Immunol Fluorescence Staining Kit with kFluor647-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
产品货号：KFS043
产品规格：300T

适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。含有kFluor 647标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，在激光共聚焦显微镜下可以观察到非常明亮的远红外荧光。kFluor647（Ex/Em：651nm/667nm）是一种常用的非常明亮的远红外荧光探针。通常该荧光探针被激发后肉眼不能观察到激发出来的长波长荧光，但可以被很多成像系统例如激光共聚焦显微镜等所检测到。kFluor647的荧光光谱与Cy5比较接近。

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。

本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。

本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂，需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

除了kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：显影粉
货号：WE0303
规格：20套

名称：*硫酸铵(粉剂)
货号：SNM397
规格：100g

名称：WB内参阳性对照
货号：SNM429
规格：100ug

名称：蛋白电泳预制胶(4-20%，10孔/15孔)
货号：SNM463
规格：10块/盒

名称：蛋白Marker(66KD)
货号：RFT041
规格：50mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质，分子量大小为66kD，可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。

使用方法：
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液：取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液

配制量	浓度	66KD母液(10mg/ml)	超纯水	5×DualColor蛋白上样缓冲液
10μl	0.2 μg/μl	0.2μl	7.8μl	2μl
50μl	0.2 μg/μl	1μl	39μl	10μl
100μl	0.2 μg/μl	2μl	78μl	20μl

3、取配制好的溶液彻底混匀后，95℃处理5分钟立即上样电泳，每次上样10μl。
4、电泳结束后，染色，观察结果。

储存条件：-20℃。

名称：SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(DAB显色)
货号：QN1232
规格：1盒
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验，DAB显色。

试剂盒组分：
封闭液(5% BSA)——————————10ml
3% H2O2-—————————————10ml
Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液-——————100ul
SABC-POD浓缩液——————————100ul
稀释液——————————————30ml
20×DAB显色液A——————————1ml
20×DAB显色液B——————————1ml

ABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

操作步骤:(以石蜡切片为例)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*，三次乙醇)。
2. 3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾 后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
4. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6．根据用量，用稀释液将Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
7．根据使用量，用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
8．DAB显色:根据用量，用PBS(pH7.2-7.4)配制，按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟，PBS漂洗两次，3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次，接上述第4步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，接上述第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。

储存条件：-20℃