产品详情
文献和实验
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库存 :478
保质期 :12个月
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :1μg
特别提示:包括pUC19 Vector 克隆载体在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:pUC19 Vector 克隆载体
产品货号:SY0297
产品规格:1μg
pUC19 Vector,一种通用型克隆载体,大小为2686bp。主要用于DNA的克隆和测序,载体上带有lacZα片段,可用于蓝白斑筛选。本品浓度100ng/μl,保存于1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl, pH 8.0; 1 mM EDTA)中。
质粒图谱
pUC19 MCS
储存条件:-20℃,有效期12个月。
除了pUC19 Vector 克隆载体,,我公司还供应以下相关产品:
名称:DNA去磷酸化试剂盒
货号:BTN130828
规格:20次
分子克隆时,载体的自连极大降低了连接效率,而对载体DNA 两个5′端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5′端标记前,也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。
产品特点:
1.基于细菌碱性磷酸酶,反应在较高温度进行,效率更高。
2. 把DNA和RNA 5′端的-PO4基团变成-OH基团,丧失连接能力。
3. 模板可以是单链,也可以是双链,既可以是DNA,也可以是RNA。
4.处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。
试剂盒组成
成分 | 规格 |
10×去磷酸缓冲液 | 100μl |
细菌碱性磷酸酶(0.5U/μL) | 50μl |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为6个月。
使用方法:
注意:dNTP和ATP 也是碱性磷酸酶的底物,所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP,一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶,降低DNA 去磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(50μL):
成分 | 用量 |
DNA片段 | 不超过10pmol |
10×去磷酸缓冲液 | 5μl |
细菌碱性磷酸酶 | 2.5μl |
超纯水到 | 50μl |
2、65℃反应30分钟。如果是RNA样品,建议在37℃反应30分钟。
3、酚*仿抽提去除酶活性,乙醇沉淀DNA 待用(见附)。
附:酚/*仿抽提DNA、乙醇沉淀浓缩DNA(本试剂盒不提供相关试剂,需要从本公司另购相关试剂,下列操作仅供参考):
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超纯水增加体积,以免纯化过程中DNA 丢失。如果有必须,可以加入和4μL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入100μL 酚/*仿/异*醇25:24:1 混合液震荡半分钟混匀,室温12000g离心3分钟,转移上清到新离心管中。
3、重复上步操作一次。
4、加0.1倍体积(即10μL)的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍体积(即250μL)的无水乙醇。
6、混匀后12000g 4℃离心10分钟,小心弃上清。
7、加入1mL 70%乙醇,短暂离心3分钟后小心弃上清。
8、短暂离心5秒,吸弃残留液体(约30-50μL)。
9、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA,立即使用或放-20℃长期保存。
北京百奥莱博科技有限公司
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