产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :107
英文名 :FFPE direct RT-PCR Kit (RNA extraction-free)
保质期 :长期
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :冷藏
规格 :30次
特别提示:包括石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)
英文名称:FFPE direct RT-PCR Kit (RNA extraction-free)
产品货号:BTN131176
产品规格:30次
除了石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取),,我公司还供应以下相关产品:
名称:即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
货号:BTN101219
规格:50次
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。
产品特点:
1.一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。
2. 即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
双酶一管式qRT-PCR Buffer,2× | 750μl |
MMLV-Taq Mix | 100μl |
RNase-free水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):
成分 | 样品 |
自备RNA模板(分下面三种情况) | 见下 |
总RNA | 100-500ng |
或poly(A)mRNA | 10-500ng |
或体外转录得到的专一RNA | 0.01pg-500ng |
RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM(注1) |
RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM |
RNase-free水 | 补到10μL |
双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×) | 15μl |
自备ROX(某些荧光PCR机型需要) | 3μL(注2) |
MMLV-Taq Mix | 2μl |
注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。
注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、最后72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。
北京百奥莱博科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:9年