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文献和实验
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英文名 :First Strand cDNA Synthesis Kit for RT-PCR (AMV)
保质期 :见产品外包装
保存条件 :−20°C
供应商 :嵘崴达
库存 :需确认
规格 : 30 REACTIONS
RT-PCR第一条链cDNA合成试剂盒(AMV)sufficient for 30 reactions (including 5 control reactions), kit of 1 (10 components), suitable for RT-PCR, hotstart: no, dNTPs included
别名:
RT-PCR, cDNA sysnthesis
一般描述
使用AMV RT进行第一链cDNA合成具有一定优势。与M-MuLV RT相比,AMV RT具有更高的热稳定性,与在+ 37°C进行的反应相比,在+ 42°C下进行的反应,具有更高的特异性和更好的二级结构解析度。第一链cDNA合成试剂盒以两步RT PCR用作起始反应,合成第一链cDNA。本试剂盒包含用于第一链合成的逆转录酶AMV、两种不同引物、PCR核苷酸混合物和对照 Neo pa RNA。可以使用标准程序克隆RT-PCR生成的PCR产物。
扩增RNA需要将RNA底物转化为DNA。这一过程可以通过使用逆转录酶实现,例如使用AMV RT(禽成髓细胞瘤病毒逆转录酶)或M-MuLV RT(莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶)。所得cDNA可用作标准PCR模板。
AMV RT在一个或多个位点合成新的cDNA链,而位点由所用引物的类型决定:
- 如使用Oligo-p(dT)15用作引物,则位点在聚(A)mRNA的3′端
- 如使用随机引物p(dN)6,则位点在沿着mRNA模板的非特异性点处,或
- 在由序列特异性引物确定的位点处。
特异性
热灭活:在95℃处理5min逆转录酶AMV
应用
用于RT-PCR(AMV)的第一链cDNA合成试剂盒适用于:- 检测是否存在RNA病毒或其他含RNA的微生物(与PCR结合使用)
- 定量mRNA,监测特定mRNA的差异表达
- “差异显示mRNA”的第一步
- 生成cDNA文库,具有大范围和全长插入片段
- 逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR),将RNA逆转录成互补DNA
特点和优势
稳健性:- 转录总RNA、mRNA和病毒RNA以及难以转录的二级RNA结构
- 获得最大12 kb的cDNA转录物
- 与M-MuLV逆转录酶相比,热稳定性(最高50°C)和特异性更好
- 无需在PCR反应之前纯化所得cDNA
可使用序列特异性引物、聚(dT)15引物或随机引物p(dN)6
包装
1个试剂盒包含10种组分。11483188001 | First Strand cDNA Synthesis Kit for RT-PCR (AMV) /RT-PCR第一条链cDNA合成试剂盒(AMV) |
11087789001 | Collagenase H, 2.5g, non-steri,胶原酶H |
11277049001 | Deoxynucleoside triphosphate S,脱氧核苷三磷酸S |
11418432001 | Taq DNA Polymerase,5units/Ál(4,Taq DNA聚合酶 |
11647687001 | Taq DNA Polymerase,1unit/Ál (4,Taq DNA聚合酶 |
10380385001 | Restr.-Endonucl. Hpa I, 100 u, |
11596594001 | Taq DNA Polym., 5 units/Ál (10,Taq酶高分子 |
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