BalbMulti多重PCR Mix价格_品牌:百奥莱博-丁香通官网

库存：280

英文名：BalbMulti PCR Mix

保质期：长期

供应商：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件：-20℃

规格：1ml|5ml

特别提示：包括BalbMulti多重PCR Mix在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BalbMulti多重PCR Mix
英文名称：BalbMulti PCR Mix

产品货号：BalbMulti多重PCR Mix
产品规格：1ml|5ml

BalbMulti PCR Mix浓度为2×，是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程，只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重 PCR反应。本品中所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶，可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。此酶与能提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合，使反应体系中所有的引物都能有效延伸，无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer，有助于实现“困难”模板(比如高GC含量的模板)的高效扩增。BalbMulti PCR Mix适用于各种类型的多重PCR反应，比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×BalbMulti PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、2～8℃存放三个月，活性无明显改变。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BalbMulti PCR Mix	25μl	1×
Primer Mix，10μM each	1μl	0.2μM
Template DNA	适量
ddH2O	up to 50μl

注意：引物设计时，尽量减小各引物的Tm间的差值，差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以终浓度0.05-0.2μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性扩增时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10min
变性	95℃	30s	30-40个循环
退火	55-65℃	30s
延伸	72℃	1kb/min
终延伸	72℃	5min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

除了BalbMulti多重PCR Mix,，我公司还供应以下相关产品：

名称：PCR Mix染料
货号：BTN131212
规格：10mL
本产品可加入到PCR反应液中，使PCR产物可直接上样电泳，其分子量相当于50bp大小的DNA片段，不干扰观察。
注：本产品不是PCR荧光染料，是一类可见光染料(类似电泳用的溴酚蓝，二甲*蓝等指示剂)

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

名称：DNA Shuffling试剂盒
货号：BTN131178
规格：10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组，它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术，它以一个或多个基因为起始材料，通过先随机断裂成小片段，再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物)，最后再进行常规PCR(外加引物)等处理，最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下：
DNA Shuffling试剂盒原理示意图

产品特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化，1-2天即可完成，节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

试剂盒组成：

成分	规格
PCR Mix 3.0，2×	1.5mL
DNase I溶液(1U/μL)	10μl
溶液A，10×	60μl
溶液B，10×	60μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法：
1.待突变基因片段的制备：待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb，同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段，则彼此的比例为1:1)，并且必须通过胶回收的方法回收，以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴，同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制，方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中，按顺序加入下列成分：

成分	用量
待突变基因片段(第1步制备)	2μg
溶液A	5μl
溶液B	5μL
DNase I工作液(第2步制备)	2μL
超纯水	36μL

4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟，然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳，用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意：一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围，最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA，否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR：