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提供商 :上海信裕生物科技有限公司
规格 :50ug/100ug
PurifiedAnti-humanCD9产品描述外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子;然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。宇玫博生物自主开发的外泌体快速提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于血清、血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒,可用于电镜分析、NTA粒径分析、蛋白分析研究等。
产品组成
组分名称 | 规格 |
Blood IsoExo Solution*(BIS) | 100 mL |
*RNase/DNase Free, Sterile |
1,高速离心机 (可以达到10000 g离心力),2 mL离心转子,1.5 mL离心管;
2,1×PBS缓冲液(无菌);
PurifiedAnti-humanCD9操作规程
一、样品预处理
1,取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;
2,样品初始用量:(单次提取时的样品量)
样品名称 | 最低量 | 最高量 |
血 清 | 0.2 mL | 1 mL |
血 浆 | 0.2 mL | 1 mL |
4,上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离心管中;
5,离心去杂质:转移后的上清液于4℃以10000 g离心20 min,去除样品中杂质,将离心后的上清液转移至新的离心管中。
二、PurifiedAnti-humanCD9提取外泌体
1,上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入Blood IsoExo Solution (BIS)试剂,具体的加入剂量如下:
样品名称 | 样品剂量 | BIS剂量 |
血 清 | 0.2 mL | 1 mL |
血 浆 | 0.2 mL | 1 mL |
2,溶液混合:加入ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再放置于2℃至8℃静置2h;
3,沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于4℃以10000 g离心60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒;(注:尽可能吸净上清液)
4,外泌体重悬:取50 μL 1×PBS均匀吹打离心沉淀物,待其均匀悬浮在PBS中后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中;(建议PBS液加入体积:初始样本体积=1:4)
5,PurifiedAnti-humanCD9收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃以12000 g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。
6,外泌体的保存:提取后的外泌体保存于-80℃低温冰箱中,以备后继实验使用。
储存条件
本品在室温可稳定保存24个月,使用前请充分混匀。
注 意
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!
上海信裕生物科技有限公司
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