EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)

EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)

价格: ¥380 - 3800

品牌:百奥莱博

货号:BTN11-180501-PGD

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库存 :52

保质期 :长期

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 :冷藏

规格 :50次

特别提示:包括EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)

产品货号:EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)
产品规格:50次



除了EB病毒核酸荧光定量PCR检测试剂盒(染料法),,我公司还供应以下相关产品:



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口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的多种偶蹄动物高度接触性传染病。口蹄疫病毒属于小核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属,病毒基因组为单股正链RNA,约含8500个核苷酸。目前已知该病毒有7个血清型,分别为O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3,每种血清型包括多个亚型,各型之间无交叉保护。我国及周边国家流行O型、A型和Asia1型3种血清的FMDV,对FMDV进行准确定型和遗传变异分析,是FMD疫苗选择和防控措施制定的重要依据。为此,本公司建立了一种能扩增O型、A型和Asia1型3种血清型FMDV的通用RT-nPCR方法,灵敏度高,特异性强。

产品特点:
1. 通用性强,可用于O型、A型和Asia1型3种血清型FMDV的定性鉴定检测和分子流行病学调查。
2. 能对样品中FMDV进行快速检测,具有良好的特异性和敏感性。
3. 结合扩增产物的克隆测序技术,可对FMDV进行准确分型。
4. 使用一管式RT-PCR试剂盒,减少了操作步骤,降低了操作误差。

产品组成:
组分 编号 规格
双酶一管式RT-PCR Buffer,2× BTN91202A 750 μL
MMLV-Taq Mix BTN91202B 100 μL
即用型PCR Mix 3.0 BTN90805 1.5mL
通用FMDV专一性引物对一 yw13151316 100 μL
通用FMDV专一性引物对二 yw13171318 100 μL
通用FMDV阳性对照 yw13191320 50 μL
超纯水 BTN100935 1mL


保存条件:-20℃保存,有效期一年。

使用方法:

一、样品RNA的制备
用自选方法纯化FMDV样品的RNA,也可以另购本公司的一管式病毒RAN提取试剂盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取试剂盒,上述两款产品跟本试剂盒兼容。

二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。

三、设置RT-nPCR反应
(一) 第一次RT-PCR:
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl体系):
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
双酶一管式RT-PCR Buffer,2× 15μl 15μl 15μl
通用FMDV专一性引物对一 2μl 2μl 2μl
样品RNA 1-5μl
通用FMDV阳性对照 2μl
补超纯水到 28μl 28μl 28μl
MMLV-Taq Mix 2μl 2μl 2μl

4. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行RT-PCR:
过程 温度 时间
逆转录 60℃ 30分钟
预变性 95℃ 5分钟
PCR反应
(30个循环)
94℃ 30s
58℃ 40s
72℃ 1分钟
延伸 72℃ 5分钟

5. 电泳检测RT-PCR产物。预期的PCR产物长度为1187 bp。
(二) 第二次PCR:
6. 在PCR管中加入下列成分(25μl体系):
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
通用FMDV专一性引物对二 2μl 2μl 2μl
第一次RT-PCR产物 1-2uL
通用FMDV阳性对照 2μl
补超纯水到 12.5μl 12.5μl 12.5uL
即用型PCR Mix 3.0 12.5uL 12.5uL 12.5uL

7. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行PCR:
过程 温度 时间
预变性 94℃ 3分钟
PCR反应
(30个循环)
94℃ 30s
58℃ 40s
65℃ 1分钟
延伸 65℃ 5分钟

8. 电泳检测PCR产物。预期的PCR产物长度为996bp。

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