核蛋白提取试剂盒

库存 ：416

英文名 ：Nuclear Protein Extraction Kit

保质期 ：长期

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20℃

规格 ：50T|100T

特别提示：包括核蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：核蛋白提取试剂盒
英文名称：Nuclear Protein Extraction Kit

产品货号：核蛋白提取试剂盒
产品规格：50T|100T

本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织)。

体外培养细胞的操作方法(裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行)：

1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞(最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白)。500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg)。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)，必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染)，加入50-100μl核蛋白抽提试剂。
10．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散，冰浴10分钟。
11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。
12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。 对于组织样品：把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200μl～500μl PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。

注意事项：
1．裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号QN1075)测定蛋白浓度。
2．对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20℃保存。

除了核蛋白提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：


BTN81218 植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用) 30次
WE0278 蛋白快速染色液 500ml
SNM402 丙*(代"烯")酰*(代"胺")(粉剂) 500g
ALH369 通用型蛋白凝胶制备试剂盒 20次|60次
ALH387 细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒 50次
RFT049 高分子量蛋白Marker(43～200KD) 20T(100μl)
KFS055 DyLight405标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 300T
KFS059 SDS-PAGE电泳液(干粉) 10×1L
KFS068 10×WB洗涤液(PBS) 100ml
KFS071 2%封闭试剂 500ml
KFS230 TNF-α蛋白检测试剂盒 50T
SY0374 12%预制胶，12孔 1盒（10块）
QN1274 非变性蛋白预制胶(4～15%) 10块
HR0111 线粒体膜蛋白提取试剂盒 50T/100T
HR8001 组织蛋白快速提取试剂盒(离心柱法) 50T/100T
HR8059 叶绿体蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用) 50T/100T
HR0101 昆虫跨膜蛋白提取试剂盒 50T/100T
HR8090 真菌蛋白提取试剂盒(无去垢剂) 50T/100T
HR0269 NP-40裂解液 50ml/100ml
MT0070 磷酸酶抑制剂混合物1(100×) 100μl|100μl×3
GL2511 乙醇脱氢酶(ADH)提取液 500ml
GL1467 Western及IP细胞裂解液 100ml
GL1475 Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 100ml