一步法感受态细菌制备试剂盒

一步法感受态细菌制备试剂盒

价格: ¥190

品牌:晶抗

货号:JK2522

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保质期 :12个月

供应商 :上海晶抗生物工程有限公司

保存条件 :4℃

规格 :100T

将质粒DNA导入细菌细胞是克隆的基础,转化感受态细菌有多种方法,如氯化钙法、电转化法等。一步法感受态细菌制备液属于化学转化法,可以快速的进行制备和转化,转化效率较氯化钙法稍低或相当,经无菌处理,用于质粒DNA导入细胞。

操作步骤(仅供参考):
接种一个单菌落于50ml LB培养基中,37℃中速(200~250r/min)摇床过夜。按1:100的比例将过夜培养的菌液加入到新鲜的LB培养基,继续培养至OD600为0.3~0.4。
加入等体积的预冷的一步法感受态细菌制备液中,冰上温和的混匀。
菌液分成小份,迅速冻存,于-70℃长期保存。进行转化时,冻存菌液应缓慢融化。
迅速融化冻存菌,将100μl感受态细菌和1~5μl DNA(0.1~100ng)加入到预冷的EP管中,4℃放置10~60min。
加入1ml Lea感受态培养液,37℃温和振荡培养30~60min。
凃板于LB平板上,培养,挑取单克隆,鉴定并保存。

上海晶抗生物工程有限公司

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