RNAi干扰

服务名称 ：RNAi干扰

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(dsRNA)时，靶基因mRNA发生降解而导致基因表达沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性和有效的干扰，可以特异地将特定的基因沉默，从而获得基因功能丧失或基因表达量的降低，这种技术已经成为研究基因功能的重要工具，并将在病毒病、遗传性疾病和肿瘤病的治疗方面发挥重要作用。 我们应用RNAi Designer软件平台，可对靶基因序列进行干扰位置效应评价和序列同源型分析，完成shRNA/micRNA等多种序列的设计，并提供一站式RNAi解决方案。

RNAi载体构建服务

♦ 利用细胞内源性miRNA加工机制，更高效地表达RNA发夹结构，采用GFP表达追踪和顺式表达多个miRNA的优点。

每个基因设计的4条RNAi Select序列，我们保证至少有1-2条可以达到至少70%转录水平的knockdown（在转染效 率>80%的前提下）。

♦ 针对特定靶基因的mRNA序列设计shRNA引物，并将其构建到由U6或H1启动子介导的慢病毒表达载体中。

♦ 利用抗生素及GFP/RFP来筛选稳定表达shRNA或miRNA的稳定细胞株和构建基因沉默的细胞系。

RNAi干扰效果检测

♦ 通过Real-time PCR方法检测细胞在转染RNAi后，靶基因mRNA水平的干扰效果。

♦ 通过Wester blot方法检测蛋白水平的基因干扰效果。


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