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Cas12a ( Cpf1) 蛋白具有类似于Cas9的RuvC内切核酸酶结构域。此外,Cpf1不具有HNH内切酶结构域,并且Cas12a的N-末端不具有Cas9的α-螺旋识别叶。Cpf1不需要tracrRNA,只需要crRNA。这非常有利于基因组编辑,因为Cas12a不仅比Cas9小,而且还具有较小的crRNA分子(接近Cas9的总sgRNA的一半)。与Cas9需要富含G的PAM相反,Cas12a -crRNA复合物通过识别富含T的PAM基序来切割靶DNA。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端。近来的研究揭示了LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA的结合释放出强大的非特异性ssDNA反式切割活性。这促使Cas 12a 可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。
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