细胞核蛋白提取试剂盒

库存 ：498

英文名 ：Nuclear Protein Extraction Kit

保质期 ：一年

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：蛋白提取液，磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃

规格 ：50T/100T

特别提示：包括细胞核蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞核蛋白提取试剂盒
英文名称：Nuclear Protein Extraction Kit
产品规格：50T/100T

核蛋白提取试剂盒提供全*(代"套")试剂，适用于从各种原代或传代细胞中提取核蛋白。
提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：蛋白提取液，磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从细胞中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝*酸蛋白酶、半胱*酸酸蛋白酶、天冬*酸蛋白酶、丙*酰-*基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
● Western 实验内参可以选用Lamin A、Lamin B、TBP、Histon H3。
● 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联*(代"系")refers@163.com 索取。

使用方法：
1．提取液制备：每200μl冷的细胞核蛋白提取液A和B中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞①，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3．用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每20μl细胞压积中加入200μl冷的提取液A，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。
5．再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。
6．弃上清。
7.在沉淀中加入200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
8．置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
9.在4℃，16000×g条件下离心10分钟。
10．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
11．将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 建议用BCA法进行蛋白定量。
③蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。