适用于UHPLC/HPLC的 SEC色谱柱TSK UP-SW3000

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供应商 ：绿百草

TSKgel UP-SW3000 色谱柱采用粒径为2 μm，键合了二醇基的硅胶颗粒充填。是一款用于生物大分子分离用的尺寸排阻色谱分析柱。填料粒径为2 µm，适合用于蛋白质、抗体、酶等生物大分子的快速分析（15 cm 规格柱）以及高分辨率分析（30 cm 规格柱）。 与现有产品TSKgel SW系列色谱柱具有相同的填料表面特性。・ 填料的特性（孔隙容量、校正曲线的斜率）与TSKgel G3000SWXL 相同，所以非常适合用来分离抗体（IgG）的二聚体、单体、抗体片段。两种色谱柱尺寸可供选择：

• • 4.6 mm I.D. x 15 cm 的规格可用于超高速的分离。
  • 4.6 mmI.D. x 30 cm 的规格可用于超高分辨率的分析。
  • 可同时兼容于UHPLC和HPLC系统
  • 必须使用半微型液相系统，即，较小死体积的液相系统才能实现较为理想的色谱柱性能。

（separate report No.116）抗体药物中使用的单克隆抗体，在生产、贮藏或运输过程中可能会形成二聚体等凝聚物，存在引发不良反应的风险因素，故在质量控制中采用体积排阻色谱法（SEC）对单克隆抗体进行分离分析。现有的 TSKgel G3000SWXL 色谱柱常用于此用途，但仍需要更高分离度以及更短分析时间的SEC 分析技术。现在 2μm 粒径的高性能 SEC 色谱柱TSKgel UP-SW3000 已实现了商品化。在本报告中，介绍了 TSKgel UP-SW3000 色谱柱的基本特性及其分离实例。
TSKgel UP-SW3000 色谱柱的基本特性
填料的特性
表 1 所示为 TSKgel UP-SW3000 色谱柱的填料特性、色谱柱规格，以及与常用于抗体分离的现有 SW 型色谱柱的性能对比。TSKgel UP-SW3000 色谱柱是以 25nm 孔径硅胶表面导入二醇基后形成的 2μm 微粒为填料的色谱柱。与现有 SW 型色谱柱相比，具有更高的分离性能，适用于抗体二聚体及单体的分离。
 
表 1：填料特性、色谱柱规格

	本色谱柱			现有色谱柱
	TSKgel UO-SW3000			Tskgel UltraSW Aggregate	Tskgel SuperSW mAb HR	Tskgel G3000Swxl
色谱柱尺寸	4.6*300mm		4.6*150mm	7.8*300mm	7.8*300mm	7.8*300mm
基质	硅胶			硅胶	硅胶	硅胶
官能团	二醇基			二醇基	二醇基	二醇基
粒径	2um			3um	4um	5um
孔径	25nm			30nm	25nm	25nm
分子量排阻范围	800kDa			2500kDa（推算）	800kDa	800kDa
分子量测定范围	10-500kDa			10-2000kda	10-500kDa	10-500kDa
用途	抗体（二聚体/单体/片段）的高效分离分析	抗体（二聚体/单体/片段）快速分析		抗体（多聚体）高效分离分析	抗体（二聚体/单体）高效分离分析	一般蛋白、抗体（二聚体/单体）的高效分离分析

标准曲线和分离性能
使用 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000（4μm）及 TSKgel G3000SWXL（5 μm）测定标准蛋白质的色谱图对比如图 1 所示，采用标准蛋白质制成的校正曲线对比如图 2 所示。具有相同孔径特性的 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000 及 TSKgel G3000SWXL 中，甲状腺球蛋白的二聚体及多聚体不会渗入小孔内而排出，进入间隙体积（V0）（图 1），校正曲线的斜率相同（图 2）。表 2所示为样品核糖核酸酶 A 的理论塔板数。粒径较小的TSKgel UP-SW3000 比其他色谱柱的理论塔板数更高。图 3 所示为使用 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000、及 TSKgel G3000SWXL 分离单克隆抗体的色谱图对比，表 3 所示为各溶出峰分离度（R）的对比。粒径较小的 TSKgel UP-SW3000 比其他色谱柱的分离度更高。（separate report No.116）


TSKgel Amide-80 2um：在原有产品Amide-80系列色谱柱基础上，采用小粒径2 µm填料充填的HILIC色谱柱。适用于对糖类、多肽、核酸等亲水性化合物的分离分析。