Southern blot

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提供商 :研载生物

服务名称 :Southern blot

一、技术简介
Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。可用于检测样品中的DNA及其含量,了解基因的状态,如是否有点突变、扩增重排等。
将待检测的DNA分子用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补的原理进行结合,游离探针洗涤后用自显影或其它合适的技术进行检测,从而显示出待检的片段及其相对大小。
二、实验流程
1. 电泳。
2. 印迹转移。
3. 固定DNA。
4. 预杂交。
5. 杂交。
6. 洗膜。
7. 实验结果图片扫描。
三、服务说明及结果
1. 客户提供: 
(1) 待杂交目标基因序列和引物序列(公司可以提供引物设计扩增,费用另计)。
(2) 客户提供的样品必须干冰或带冰袋运送。
    如提供DNA样品必须要达到以下条件:
    A. DNA完整性好,无降解或RNA污染,客户需提供电泳图;
    B. DNA纯度高,客户需提供分光光度检测OD260/OD280在1.8左右;
    C. 勿用TE溶解DNA,DNA浓度不低于 0.8μg/μl,杂交需模板DNA约 20μg /泳道/次;
    D. 长途运输至乙方,可将检测合格的DNA溶液编号密封,注意切勿泄漏,低温快递。
(3) 请注明酶切方案,如果项目中需要用到非常规的限制性内切酶,需额外加收酶切费用或有客户提供相应的限制性内切酶。
2. 公司提供:结果图片,实验说明,结果分析报告。
3. 实验周期:20个工作日。




 

研载生物科技(上海)有限公司

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