反转录PCR（reverse transcription PCR

提供商 ：研载生物

服务名称 ：反转录PCR（reverse transcription PCR

一、技术简介
逆转录PCR，或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。（检测基因表达的方法，参见Northern Blot法。
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。随后，DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成，随每个循环倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互补DNA。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种，即鸟类成髓细胞性白细胞病毒（avian myeloblastosis virus, AMV）反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒（moloney murine leukemia virus, MMLV）反转录酶。
二、实验流程
1. RNA抽提。
2. cDNA第一链合成。
3. PCR扩增。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：样本。
2. 公司提供：电泳图、完整报告。
3. 实验周期：5-10个工作日。