cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)

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英文名 ：First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)

保质期 ：长期

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：-20℃

特别提示：包括cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
产品规格：20次|100次

本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394），用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。

使用本试剂盒合成的第一链，可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。

使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1)，反转录的最大长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）的情况下，由于缺失了RNase H酶活性，RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解，这样反转录出来的cDNA的长度就会更长，并且产量更高。


使用本试剂盒对总RNA反转录后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）热稳定性高，最适反应温度为42-45℃，但当温度达到50℃时仍具有很高活性，且可获得较高产量的cDNA。

试剂盒中提供了RNase Inhibitor，确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。

试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物，前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录，后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。

本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行20个cDNA第一链样品的合成。

产品组份：
M-MLV反转录酶II(RNase H-)——————————20μl
Reaction Buffer (5X)————————————0.1ml
RNase Inhibitor (20U/μl)——————————20μl
dNTP Mix (10 mM each)————————————40μl
Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)——————20μl
Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)——————20μl
DEPC-treated Water——————————————0.3ml

储存条件：-20℃。