PI细胞周期与凋亡试剂盒

库存 ：10000

英文名 ：PI

CAS号 ：无

保质期 ：一年

供应商 ：弗元生物

保存条件 ：-20

规格 ：100T

货号	规格	价格（元）
FY600002-20T	20 TEST	176
FY600002-50T	50 TEST	426
FY600002-100T	100 TEST	806

 

产品简介：

本产品基于碘化丙啶（Propidium, PI）染色方法分析细胞周期和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料，其嵌入双链DNA中可以产生荧光，荧光的强度和双链DNA的量成正比。

在正常细胞周期中，G0和G1期有1套染色体，G2和M期细胞有2套染色体，S期介于两者之间。经PI染色后，处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度不同。假定G0和G1期的细胞荧光强度为1，那么G2和M期的细胞的荧光强度为2，S期的细胞介于1和2之间。

细胞凋亡时，由于细胞核皱缩和DNA片段化，染色时DNA片段会从打孔的细胞膜处丢失，流式细胞仪检测时，荧光强度小于1，即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。

细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。凋亡前期，染色质皱缩，细胞密度增加，前向角光散色显著降低。凋亡后期，细胞产生凋亡小体，前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。

本产品可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测，也可用于组织细胞检测。

 

自备耗材和设备：

1 ml 移液器

100-200 μl 移液器

旋窝混匀仪

流式细胞仪

PBS

75%乙醇

适用实验与操作过程：

1. 细胞准备-

贴壁细胞：弃细胞培养液，胰酶消化，制备单细胞悬液，1000 g离心5分钟，弃上清。沉淀用1 ml预冷的PBS重悬。再次1000 g离心5分钟，弃上清。

悬浮细胞：收集细胞悬液，1000 g离心5分钟，弃上清。沉淀用1 ml预冷的PBS重悬。再次1000 g离心5分钟，弃上清。

组织细胞：将组织块用剪刀剪成尽量小的小块后，用0.25%的胰酶消化0.5-1个小时。经过200-400目筛网过滤得到单细胞悬液。1000 g离心5分钟，弃上清，沉淀用1 ml预冷的PBS重悬。再次1000 g离心5分钟，弃上清。

注意，最后一次离心，弃上清后留50 μl上清，涡旋混匀。

 

2. 细胞固定

细胞沉淀用1 ml -20 ℃预冷的75%乙醇轻轻混匀，4℃固定2小时以上或者过夜。然后，1000 g离心5分钟，轻轻弃上清，沉淀用1 ml预冷的PBS重悬，1000 g离心5分钟，弃上清。

 

3. 染色

PI染色工作液配置：0.5 ml染色缓冲液（C液）中加入10 μl PI染液（A液）和10 μl RNase A（B液），混匀待用。每个细胞样品加入0.5 ml配置好的PI染色工作液，轻轻混匀重悬细胞。37℃，避光孵育30分钟，直接上流式细胞仪检测（5小时内完成为佳）。激发波长为488 nm，检测红色荧光。

注意：每个检测细胞数不超过1×10⁶个。

 

产品说明书下载

弗元生物是国家高新技术企业、上海市科委认定的科技型企业，致力于打造具有国际影响力的生物医学品牌。公司以干细胞与再生医学研究为核心，业务经营范围辐射生物医学领域的多个相关学科。团队拥有自主研发的核心知识产权，在国际期刊杂志发表论文8篇，中文核心期刊发表论文1篇，申请国家发明专利7项，已获得授权的实用新型专利2项，拥有注册商标9项。

    生命科学部，已经形成以无血清培养基、肝类器官分化试剂盒为旗帜产品的充质干细胞、再生医学与器官发育等多个产品系列；肝类器官分化试剂盒为国内开创性肝类器官产品；产品已获得nature communications、cell proliferation、stem cell research and therapy等杂志文献引用。技术服务部，服务了多家知名企业和科研机构，在再生医学的基础和转化研究完善了服务体系。