Y187感受态细胞

保存条件 ：零下80度

保质期 ：1年

英文名 ：Mach1-T1Chemically Competent Cell

库存 ：1000只

供应商 ：上海淳麦

规格 ：20*100ul

Y187酵母感受态细胞基因型：

MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101,  trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ, URA3 : : GAL1_UAS-GAL1_TATA-lacZ, MEL1


Y187酵母感受态细胞简要说明：
Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂，双杂实验用菌株，MATα型，可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株（Y2HGold，AH109等）通过mating操作进行筛库试验。
Transformation  marker为: trp1, leu2，报告基因为：lacZ, MEL1。
Y187 -GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。
质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；
Y187酵母感受态细胞操作说明：

1.  取100 μl冰上融化的Y187感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/LiAc  500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min时翻转6-8次混匀）。
2.  将管放42度水浴15min  （7.5 min时翻转6-8次混匀）。 

3. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH₂O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。
4. ddH2O 50ul重悬，涂板,29℃培养48-96h。
 

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