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文献和实验
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保存条件 :零下80度
保质期 :1年
英文名 :TOP10Chemically Competent Cell
库存 :1000只
供应商 :上海淳麦
规格 :20*100ul
EHA105农杆菌感受态细胞
EHA105 Chemically Competent Cell
产品编码: 保存条件: -80℃
产品规格:
EHA105 | 20×100μl |
pCAMBIA2301(control vector) | 10ng/ul 10ul |
EHA105农杆菌感受态细胞基因型:
C58 (rif R) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) (strepR) Succinamopine
EHA105农杆菌感受态细胞简要说明:
EHA105菌株由EHA105菌株改造而来,为C58型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) ,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。
pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签:strep,赋予EHA105菌株链霉素抗性,适用于水稻、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达104cfu/μg。
EHA105农杆菌感受态细胞操作说明:
- 取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
- 每100μl感受态加1ug(体积不大于10ul)质粒DNA,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
- 加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50ug/ml kan 时,28℃培养48h即可;平板中同时加入50ug/ml kan,20ug/ml rif 时,需28℃培养60h;如果使用的平板含有50ug/ml rif 则需要28℃培养72-90h)。
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上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。
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