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文献和实验
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保存条件 :零下80度
保质期 :1年
英文名 :JM109Chemically Competent Cell
库存 :1000只
供应商 :上海淳麦
规格 :20*100ul
BL21(DE3)pLysS感受态细胞基因型:
F- ompT hsdS(rB-mB-) gal dcm(DE3)pLysS CamrBL21(DE3)pLysS感受态细胞简要说明:
BL21(DE3)pLysS 感受态细胞携带 pLysS质粒,具有氯霉素抗性。pLysS含有表达 T7 溶菌酶的基因,T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶), BL21(DE3)pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
BL21(DE3)pLysS感受态细胞操作说明:
- 取100μl冰上融化的 L21(DE3)pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置 25分钟。
- 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
- 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
BL21(DE3)pLysS感受态细胞注意事项:
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 混入质粒时应轻柔操作。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
- 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
6. BL21(DE3)pLysS 菌株携带 pLysS质粒,除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有34 µg/ml氯霉素,以防质粒丢失。
BL21(DE3)pLysS感受态细胞其他推荐:
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上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类,极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
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