BCA蛋白定量分析试剂盒(BCA Protein Assay Kit) PIERCE Thermo 23227 现货

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Thermo Scientific 总蛋白定量试剂盒和试剂   Pierce BCA Protein Assay   BCA 蛋白定量分析试剂盒实验室使用最多的去污剂兼容型蛋白定量试剂! Thermo Scientific BCA 蛋白定量产品可以用于研究蛋白:蛋白间相互作用,衡量亲和层析后的组分含量,估算从细胞裂解液里提取的膜蛋白含量和高通量筛选融合蛋白。

产品特点:

• 比色法;在562 nm 读数

• 与多数离子和非离子型去污剂兼容

• 比经典的Lowry 方法快4 倍,同时操作更加简单

• 所有试剂在室温下稳定2 年

• 工作液可稳定存放24 小时

• BSA 的线性范围为20-2,000 μg/ml

• 改良的操作最小可以检测到 5 μg/ml

• 方便的微孔板和比色杯形式

• 蛋白:蛋白差异比染料结合法小

用Thermo Scientific BCA 蛋白定量分析试剂盒对Thermo Scientific 白蛋白标准品(BSA,产品货号23209)和牛血清Gamma 球蛋白标准品(BGG,

产品货号 23212)进行分析所获得的颜色反应曲线。

BCA蛋白定量分析检测蛋白的原理:
BCA蛋白定量分析结合了众所周知的蛋白在碱性介质中可将Cu2+还原为Cu1+的能力以及使用二喹啉甲酸对一价铜离子(Cu1+)进行高度灵敏的选择性比色检测方法。实验第一步是在碱性环境下使铜离子与蛋白质螯合形成浅蓝色复合物。在这一双缩脲反应中,含有三个或更多氨基酸残基的多肽可与铜离子在含酒石酸钾钠的碱性环境中形成有色的螯合复合物。

在第二步显色反应中,二喹啉甲酸(BCA)会与第一步中生成的还原性(一价铜)阳离子反应。两分子BCA与一个一价铜离子螯合可形成深紫色的反应产物。BCA/铜复合物可溶于水,随着蛋白浓度升高而在562nm出表现出强烈的线性吸收峰。BCA试剂相比第一步的浅蓝色产物要灵敏大约100倍左右(检测极限更低)。

BCA颜色形成的反应会受到蛋白质的氨基酸序列中四种氨基酸残基(半胱氨酸或胱氨酸、酪氨酸、色氨酸)的强烈影响。不过不同于考马斯染料结合法,普通的多肽骨架也有助于颜色形成,从而最小化由蛋白质组成差异造成的可变性。

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