AT4301-03 ATPure Plus beads(DNA片段分选纯化磁珠)

AT4301-03 ATPure Plus beads(DNA片段分选纯化磁珠)

价格: ¥22500

品牌:开泰生物

货号:AT4301-03

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产品详情

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规格 :450ml

杭州客户,首次购买,可上门指导操作!

产品简介

     该试剂盒采用磁珠纯化方式,适用于高通量测序文库(NGS)构建中DNA片段大小快速分选和回收。DNA片段筛选试剂盒的结合缓冲液中含有超顺磁珠,根据磁珠悬浮液和样品的体积比可选择性结合DNA片段。经过磁性分离和乙醇清洗,低盐洗脱缓冲液或无核酸酶水洗脱的高纯度的DNA片段不含有核苷酸,引物,接头,酶和盐等污染物,可被直接用于下游应用,比如:酶切、测序、杂交、PCR反应等后续操作。可应用于手动或自动液体操作设备。

产品优势

1. 适合DNA的片段范围广:100 bp~50 kb
2. 回收率高:回收率高达80%以上;
3. DNA纯度高:回收的PCR产物纯度高;
4. 操作快速简单:20 min即可完成整个操作流程,无需离心;
5. 可适用于自动化、高通量PCR产物纯化。
6. 该试剂盒使用步骤和国外beckman Ampure XP高度一致,直接替换
7. 价格低,订货期短等明显优势。
产品原理

1(核酸纯化试剂盒大致工作原理)

自备仪器和试剂

1.磁力架
2.洗涤液:80%乙醇水溶液。
3.洗脱液:Buffer EB10mM Tris-HClpH 8.0);或者RNase-Free Water

操作步骤

DNA 片段分选(两步法,第一步:1.2X。第二步:0.56X。)
1,各取80uL DNA 样品加入到EP 管内,各加入96 ul 的磁珠,吹吸混匀,室温静止5min;磁力架上静止5min
2,移取上清液至新的1.5 ml EP 管内,并各加入45 ul 的磁珠,吹吸混匀,室温静止5min;磁力架上静止5min,去上清;
3,用80%乙醇洗涤磁珠两遍,并晾干;
4,用25 ul H2O 洗脱,转移出15 ul 液体用于2100 检测;

性能实例:
1.核酸片段筛选测试:
测试目的:通过DNA片段筛选测试自主研发试剂盒与国外进口试剂盒性能差异
1)测试平台:安捷伦2100生物分析仪
2)实验方法:将大片段DNA打断后添加磁珠纯化试剂盒进行片段筛选,运用两步法对样品进行核酸片段筛选回收
2如下:

                             
  图2,安捷伦2100生物分析仪片段选择对比测试结果:自主研发试剂盒与国际商品化品牌Ampure XP 试剂盒核酸片段回收对比(左图为Ampure XP品牌核酸纯化试剂盒安捷伦2100生物分析仪检测回收核酸平均片段大小,平均片段大小为265;右图为自主研发核酸纯化试剂盒利用安捷伦2100生物分析仪检测回收核酸平均片段大小,平均片段大小为265;)对比结果十分接近。
2. DNA回收效率测试
测试目的:检测对DNA片段的回收效率
实验方案:大片段DNA打断后,经试剂盒一步法纯化后(1.8X)测试DNA回收效率
3如下:
测试品牌 DNA总投入量 纯化后DNA回收效率(%)
Ampure XP-1 5ug 84.20%
Ampure XP-2 5ug 83.87%
自主研发试剂盒-1 5ug 84.40%
自主研发试剂盒-2 5ug 84.12%
 由表3可以看出,DNA回收效率测试结果相近,都达到80%以上。

3.分DNA片段推荐试用比例
 
文库平均长度(插入片段+接头+引物) 300bp 350bp 400bp 500bp 600bp 700bp
第一次分选磁珠体积 0.8倍 0.7倍 0.6倍 0.55倍 0.5倍 0.45倍
第二次分选磁珠体积 0.2倍 0.2倍 0.2倍 0.15倍 0.15倍 0.15倍

 

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