1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)折扣价

1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)折扣价

价格: ¥110 - 2280

品牌:百奥莱博

货号:SY0321-KJD

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库存 :609

英文名 :1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors

保质期 :12个月

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 :-20℃

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)折扣价的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。


名称:1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)折扣价
编号:SY0321
规格:100ml
英文名:1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液(1×),裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。

注意事项

1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:

(一) 培养细胞样品:
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。

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·10×Tris-Glycine Native电泳缓冲液
编号:SY0364
英文名称:10×Tris-Glycine Native Running Buffer
规格:500ml
本缓冲液是10倍浓缩液,在使用前只需用去离子水稀释到1×工作液即可。Tris-Glycine Native 电泳缓冲液,即Tris-Glycine Native Running Buffer,即可用作天然Tris-甘*酸凝胶(不含SDS)的电泳缓冲液,也可用于制备标准的Western Blot电转缓冲液。

Tris-Glycine Native Running Buffer [1×]:25 mM Tris, 192 mM Glycine, pH 8.5。

储存条件:室温

·脱氧胸苷三磷酸溶液(100 mM)(dTTP)
编号:SY0043
英文名称:dTTP Solution(100 mM)
规格:400ul
dTTP即2’-deoxythymidine 5’-triphosphate,中文名为脱氧胸苷三磷酸,常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。

本产品为溶液*盐形式,用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM。

经检测,dTTP纯度大于99%(HPLC),且无DNase和RNase污染。本产品为即用型,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。

注意事项
1)可以室温溶解,溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。


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