质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究

质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究

价格: ¥200 - 2210

品牌:百奥莱博

货号:BTN100811-JUS

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产品详情

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库存 :519

英文名 :MS-Compatible Silver Stain for Protein

保质期 :一年

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 :常温

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多质谱兼容型蛋白银染试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。


名称:质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究
编号:BTN100811
规格:10次
英文名:MS-Comp*(代"a")tible Silver Stain for Protein
品牌:百奥莱博
产地:北京
银染是目前检测PAGE电泳分离后的蛋白质的最灵敏的方法,MS(质谱)是确定未知蛋白最常用和最快捷的方法,但将银染得到的蛋白直接用于MS分析有很多问题,其中最主要问题是常规银染所使用的试剂(包括强氧化剂和醛类)容易使蛋白质发生化学修饰,这样MS分析得到的*基酸信息跟蛋白质实际的*基酸信息并不相同。为了使银染得到的蛋白质可以用于MS分析,为此本公司开发MS 兼容型银染试剂盒。

产品特点:
1.跟MS 兼容,原理是避免使用能化学修饰蛋白质的试剂,所得蛋白质没有发生化学修饰,故可直接用于后续的MS(包括MALDI-TOF-MS和ESI-MS)分析。
2.银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍左右,可达0.2-0.6ng蛋白质/条带。
3.可用于各种PAGE胶,包括变性PAGE胶(如SDS-PAGE,尿素-PAGE),非变性PAGE胶,IEF胶(等电电泳胶),2D胶等。
4.四种溶液都是现用现配,实验结果的可重复性好。

产品组成:

 
成分 规格
溶液A组分一干粉 1份
溶液A组分一溶剂 100ml
溶液A组分二干粉 10份
溶液B干粉 5g
溶液C组分一干粉 10份
溶液C组分二 2ml
溶液D干粉 10份
说明书 1份


储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

准备工作:
所有溶液均需现配现用。以下按一块PAGE胶需要200mL溶液配制,用户可以根据自己PAGE胶的大小增减溶液的用量。
一、用自备试剂配制400mL固定液(按一次银染需要固定2次计算,每次固定需200mL固定液)
将160mL甲醇、40mL乙酸和200mL去离子水充分混合后即得400mL固定液。
二、配制200mL溶液A
先配制溶液A组分一储备液:将溶液A组分一干粉加入到100mL溶液A组分一溶剂中,充分摇晃溶解即得溶液A组分一储备液。此溶液可以4℃保存。将60mL甲醇、8mL溶液A组分一储备液、1 份溶液A组分二(干粉)和132mL 去离子水充分混合后即得200mL溶液A。
三、配制200mL溶液B
称0.5g溶液B干粉,溶于200mL 去离子水中,充分混合后即得200mL溶液B。
四、配制200mL溶液C
将1 份溶液C(干粉)溶解在200mL 去离子水中(干粉不容易溶解,需搅拌)即得溶液C。注意:使用前还需要再加入160μL溶液C组分二并充分混匀。
五、配制200mL溶液D
将1 份溶液D(干粉)溶解在200mL 去离子水中即得溶液D。

银染:
1.PAGE电泳(包括非变性PAGE,SDS-PAGE,尿素-PAGE,2D-PAGE,IEF-PAGE等)结束后,将PAGE胶转移到装有200mL 固定液的瓷盘或玻璃盘中,摇晃30分钟以去除干扰银染的组分(如甘*酸、SDS、尿素、DTT、甘油等),倒掉固定液。注:此步很重要,否则银染背景很高。
2.重复上步一次。
3.将PAGE胶转移到200mL溶液A中,室温摇晃30分钟。
4.用200mL 去离子水漂洗3次,每次5分钟(不要延长或缩短)。
5.将PAGE胶转移到200mL的溶液B中,室温摇晃20分钟。
6.用200mL 去离子水漂洗2次,每次1分钟(不要延长或缩短)。
7.将PAGE胶转移到200mL的溶液C中,室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要10分钟左右)。
8.将PAGE胶转移到200mL的溶液D中,室温摇晃终止反应。
9.用200mL 去离子水漂洗3次,每次5分钟(不要延长或缩短)。
10.切下条带或胶块进行后续的脱银,原位trypsin酶解,多肽沉淀和MS分析(略)。

技术资料:
MS前处理步骤(仅供参考)
1.脱银:将切下的银染斑点或条带用脱银液(30mM K3Fe(CN)3和100mM Na2S2O3的1:1的混合液)处理直到黑色消失。
2.还原:将胶块或胶条置于10mM DTT(溶剂为50mM NH4HCO3),56℃处理一小时。
3.烷化:将胶块或胶条置于55mM 碘乙酰胺(溶剂为50mM NH4HCO3),室温避光处理45分钟。
4.原位trypsin酶解:将胶块或胶条置于10 ng/uL 测序级别的trypsin溶液中(溶剂为25mM NH4HCO3),37℃处理过夜。
5.多肽提取:用5%三*乙酸抽提酶解液,再用2.5%三*乙酸-50%ACN 混合液抽提酶解液,上清真空干燥,沉淀(多肽)最后溶于0.5%三*乙酸中。
6.MS分析:参考相关MS仪器使用手册。
质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究
欲咨询购买质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
YT609 RIPA裂解液(强) RIPA Lysis Buffer
WE0399 游离DNA样本保存管(10ml,PET) Cell-Free DNA Storage Tube(PET,10ml)
BTN151103A 超级电泳液(含染料) Superbuffer
SV1388 T4 RNA 连接酶 1(ssRNA 连接酶) 高浓度
SV0004 AbaSI限制性内切酶 AbaSI Restriction Endonuclease
KFS280 长春新碱(Vinblastine) Vinblastine
SY0517 *化可的松 Hydrocortisone
SV0556 NotI-HF限制性内切酶 NotI-HF Restriction Endonuclease
BTN60905 MMLV逆转录酶 MMLV Reverse Transcriptase
HR0466 Colchicine  Colchicine
SY0158 SP1-GFP报告基因质粒 SP1 GFP Reporter Plasmid
RFT004 1kb plus DNA ladder(300~10000bp)
质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究关键词:BTN100811,MS-Comp*(代"a")tible Silver Stain for Protein,质谱兼容型蛋白银染试剂盒
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·电泳级SDS溶液(10%)
编号:BTN100881
英文名称:SDS Solution,EG
规格:250mL
本产品是电泳级的SDS溶液,专门用于配制SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶,也可用于制备变性上样液。当SDS与蛋白质的重量比超过4:1时(一般终浓度为0.1%即可),就能够打开蛋白质的二级结构,并且使蛋白质的在SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分子大小。如果蛋白质含有二硫键,必须在上样液中补充足够b-巯基乙醇。

储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

·PCR污染清除剂
编号:BTN140648
英文名称:DNA Contamination Scavenger
规格:250mL
微量核酸污染导致的PCR假阳性是广大实验者最头痛的问题之一。为解决此难题,本公司开发了本款PCR污染清除剂,本产品无毒、无腐蚀性,可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段,且无法恢复,从而彻底消除PCR 过程中由于各种环境污染而导致的假阳性扩增。

产品特点:
1.本产品为非酶类试剂,所有组分可生物降解、无毒无害。不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,不会对金属形成腐蚀。
2.产品中各组分协同作用,快速、非序列特异性的降解核酸污染。
3.使用简单,操作方便。喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用。
4.可广泛用于清除实验操作台、仪器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、镊子、手套等各种实验器材表面的DNA污染。
5.与传统的PCR污染清除方法,如:稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解变性等相比,本产品具有能彻底破坏DNA分子、有效清除小片段核酸等优点。

储存条件:常温运输和保存,有效期两年。

使用方法:
注意:以下操作均需要戴手套进行。本产品可重复使用5-10次,使用后建议密封保存。

工作平台的清洁:
直接将本产品喷于台面,最少15分钟后用普通吸水纸擦净,最后用吸水纸擦净,晾干。
实验仪器的清洁:
用浸有本品的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,晾干。用本品处理金属器械的时间不能超过15分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁:
将器皿浸泡在本产品中,静置处理最少15分钟后取出,再用蒸馏水浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
移液枪的清洁:
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在本产品中最少15分钟,再用蒸馏水彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在本产品中最少15分钟以上(最好不要有气泡),然后蒸馏水充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。


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质谱兼容型蛋白银染试剂盒 蛋白质研究

·内毒素清除试剂盒
编号:BTN160692
英文名称:Endotoxin removing Kit
规格:1.5mL
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。

细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。

试剂盒特点:
1.高稳定性,高去除效率。
2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。
8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。

试剂盒组成:
成分 规格
专用亲和介质 1.5mL预装柱
再生缓冲液 125ml
平衡缓冲液 125ml
流速控制器 1个
无热原接收管 1 包(3 支/包)
无热原枪头(1mL) 2 包(6 支/包)
说明书 1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的*化*,0.1 M的*氧化*或0.1 M盐*(代"酸")来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。
6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化*)。



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