小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

价格: ¥2800

品牌:百奥莱博

货号:ZN2716-KNQ

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产品详情

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样本 :小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清

库存 :450

标记物 :过氧化物酶

适应物种 :小鼠

应用 :用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中IGDCC4的含量

检测方法 :ELISA(双抗夹心法)

检测限 :125pg/ml~8000pg/ml

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

规格 :96T

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒的品牌:百奥莱博,是优质的小鼠ELISA试剂盒产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法)等小鼠ELISA试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。


名称:小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒
编号:ZN2716
规格:96T
英文名:Mouse Immunoglobulin superfamily DCC subclass member 4 ELISA Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中IGDCC4的含量。预先包被的抗体为IGDCC4多克隆抗体。检测相抗体为IGDCC4单克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠IGDCC4呈正相关。

检测指标:IGDCC4;NOPE;DDM36
检测范围:125pg/ml~8000pg/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<4pg/ml

产品组成:

 
组分 规格 数量
预包被抗小鼠IGDCC4抗体的96孔板 96T 1板
重组小鼠IGDCC4标准品(冻干) 10ng/管 2管
生物素标记抗小鼠IGDCC4(100X) 130μl 1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管
样品稀释液 30ml 1瓶
抗体稀释液 12ml 1瓶
ABC稀释液 12ml 1瓶
TMB显色液 10ml 1瓶
TMB终止液 10ml 1瓶
洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶
封板膜   4张


储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)

注意事项:
1.使用前TMB显色液应为无色透明溶液,若发现颜色异常,请及时与我司联*(代"系")。
2.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
3.要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
4.为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
5.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
6.本公司提供的96孔酶标板是单条可拆型酶标板,用户可按需求使用,剩余的酶标板请按保存条件贮存。
7.揭封板膜和覆盖封板膜时应避免用力过大导致液体溅出。

参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
浓度(pg/ml) 0 125 250 500 1000 2000 4000 8000
OD值 0.031 0.089 0.136 0.269 0.531 1.077 1.676 2.344

小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒
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·hairless mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0628
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.hairless mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
hairless的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


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小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

·彩色预染高分子量蛋白质标准(10-20次)
编号:ZN1885
规格:100μl
产品保存:-20℃保存,一年有效。
产品特点:
条带窄,易辨认。
颜色稳定。
明亮的参考条带。
宽分子量范围。
即用型 一可直接凝胶上样。
产品应用:
监控蛋白的SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳迁移。
监控免疫印迹杂交的蛋白转膜效率。
SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳和免疫印迹杂交确定蛋白大小。
产品说明:
预染蛋白 Ladders/marker 设计用于监控蛋白的SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳分离、验证免疫印迹时蛋白转移至 PVDF、尼龙和硝酸纤维膜的效率、粗略鉴定蛋白大小等应用(1-3)。这些预染的蛋白分子量标准由预染的原核生物重组蛋白组成,是预染的天然蛋白的混合物。彩色预染高分子蛋白质 marker 是一个四色的分子量标准,含有 10 种蛋白,分子量范围为10 - 260 kDa。四种不同的发色团与蛋白结合产生明亮的彩色分子量条带,带型容易记忆。
使用方法:
1.室温或 37℃融化 Ladder几分钟,确保试管中的固体完全溶解,不要煮沸。
2.轻轻混匀,确保溶液完全混匀。
3.上样:
小凝胶:5μl/泳道,凝胶厚度 0.75-1 mm。
大凝胶:10μl/泳道,凝胶厚度 1-1.5 mm。

·小鼠肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)检测试剂盒
编号:ZN2766
英文名称:Mouse Tumor necrosis factor receptor 2 ELISA Kit
规格:96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、细胞裂解液、细胞培养上清中TNFR2的含量。预先包被的抗体和检测相抗体为近100%纯度的TNFR2亲和纯化多克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TNFR2呈正相关。

细胞表面有两种类型的肿瘤坏死因子受体,TNFR-p60,type B;TNFR-p80,type A。它们能够中和TNFα和TNFβ的生物活性。sTNFRⅠ和sTNFRⅡ分别从TNFR-p60、TNFR-p80的细胞表面部分脱落。所有细胞都表达sTNFRⅠ,sTNFRⅡ的表达主要集中在造血干细胞和免疫系统。

检测指标: TNF-R2;TNFR2;TNFRSF1B;CD120b;TNF受体2
检测范围:15.6pg/ml~1000pg/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<2pg/ml

产品组成:
组分 规格 数量
预包被抗小鼠TNFR2抗体的96孔板 96T 1板
重组小鼠TNFR2标准品(冻干) 10ng/管 2管
生物素标记抗小鼠TNFR2(100X) 130μl 1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管
样品稀释液 30ml 1瓶
抗体稀释液 12ml 1瓶
ABC稀释液 12ml 1瓶
TMB显色液 10ml 1瓶
TMB终止液 10ml 1瓶
洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶
封板膜   4张


储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)

参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
浓度(pg/ml) 0 15.6 31.2 62.5 125 250 500 1000
OD值 0.031 0.094 0.177 0.315 0.587 1.032 1.701 2.469



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小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

·PDGF-A mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1104
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse,rabbit
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.PDGF-A mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
PDGF-A的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。



小鼠IGDCC4检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

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