RT-PCR

服务名称 ：RT-PCR检测技术服务

提供商 ：上海冷泉生物科技有限公司

Rt-PCR
1.概念和原理
    RT-PCR称为逆转录PCR或反转录PCR，是指在体外将mRNA逆转录为互补cDNA后，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。
逆转录PCR（reverse transcription PCR）或者称反转录PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
 

RT-PCR，实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

3复孔，1重复


2.科研和临床应用
    主要用于特异基因mRNA表达水平的检测、病原体定性检测、获得特异基因的编码序列用于后期表达载体构建等领域。
3.标本采集、保存、运输
全血样本：用EDTA抗凝管收集2 ml全血，颠倒混匀抗凝管8-10次，-80℃保存，冷冻运输。组织样本：新鲜组织样本离体后，用预冷PBS或生理盐水快速将表面残留的血迹冲洗干净，切成黄豆大小，装入2 0mIEP管或体积更大的旋盖冻存管中，立即置于液氮中冷冻3-4 h以上，然后转移至-80℃或液氮中保存，冷冻运输。细胞样本：离心收集细胞（≥1×1 06个），加入适量（如使用TRIzol，通常为1 ml）细胞裂解液，反复吸打数次，直至看不见成团的细胞块，使之充分溶解于裂解液中形成清亮不粘稠的液体，-80℃保存，冷冻运输。

RT-PCR实验服务内容:
RNA的抽提与定量；
引物设计及RT-PCR；
琼脂糖电泳；
图片分析；
实验报告提交。

实验交付：
1、RNA浓度及荧光定量PCR原始数据；
2、详细实验报告一份，含荧光定量PCR完整的实验步骤、使用仪器、软件设置参数等。

收费标准/服务周期/提供结果：
具体的实验费用以及实验周期欢迎咨询详谈，我们会依据您的方案及需求为您制定详细的实验方案与服务。
【冷泉可以为您提供以下实验技术服务】
    我们将在免疫学，分子生物学，病理学，病理分子生物，代谢组学，生化技术，动物实验，蛋白组学实验，动物模型构建，细胞培养，基因组服务，病毒学，药物研究技术，核酸检测服务，芯片技术平台，微生物基因组测序……技术服务

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