人食欲素受体(OXR)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒

人食欲素受体(OXR)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒

价格: ¥500 - 2000

品牌:yaji

货号:YS01617B

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产品详情

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库存 :大量

供应商 :上海雅吉生物

检测限 :6个月

检测方法 :酶联免疫

适应物种 :

标记物 :见说明书

样本 :血清、血浆–组织匀浆–腹水–细胞、培养上清

规格 :48次/96次

人食欲素受体(OXR)酶联免疫分析(ELISA


                                      试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中食欲素受体(OXR)的含量。  实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中人食欲素受体(OXR)水平。用纯化的人食欲素受体
(OXR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的食欲素受体(OXR)标准品和未知浓度的食欲素受体(OXR)待检样品,温育后,加入生物素标记的抗 IgG 抗体,再与链霉亲和素-HRP 结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的食欲素受体(OXR)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD ,通过标准曲线计算样品中人食欲素受体(OXR)浓度。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1

8
标准品 S112ng/L 0.5ml×1
2 链霉亲和素-HRP 6ml×1 标准品 S26ng/L 0.5ml×1
3 酶标包被板 12 孔×8 标准品 S33ng/L 0.5ml×1
4 生物素标记的抗-IgG 抗体 6ml×1 标准品 S41.5ng/L   0.5ml×1
5 显色剂 A 6ml×1 标准品 S50.75ng/L 0.5ml×1
6 显色剂 B 6ml×1/ 9 说明书 1
7 终止液 6ml×1 10 封板膜 2

标本要求
  1. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

操作步骤

  1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复  孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
  2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品 50μl,在样本反应孔中加入 50 微升样本,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育 45 分钟。
  3. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
  4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 4 次,拍干。
  5. 加生物素标记的抗-IgG 抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG 抗体 50μl37℃温育 30 分钟
  6. 洗涤:操作同 4
  7. 加链霉亲和素-HRP:每孔加入 50μl 的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育 30

分钟。
  1. 洗涤:操作同 4
  2. 显色:每孔先加入显色剂 A 50μl,再加入显色剂 B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
  1. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色
  2. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD  测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
 

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。

注意事项

  1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4. 如标本中待测物质含量过高样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD ,请先将样本稀释一定倍数(n 后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数×5×n
  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6. 本试剂不同批号组分不得混用。显色剂 B 请避光保存。
  7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 线性范围:
0.3ng/L -15 ng/L

规格:

96 人份/

保存条件及有效期

  1. 试剂盒保存:;2-8℃。
  2. 有效期:6 个月

上海雅吉生物科技有限公司

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入驻年限:8年

联系人:王源

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