¥0
¥20
距活动结束
0天0时0分0秒
【试用装】CCK-8细胞增殖检测试剂盒50T
42 人参与
试用规则
提交申请
商家审核
联系发货
提交报告
试用说明
1、试用品规格:50ul; 2、运费: 包邮 ; 包邮; 3、联系时间: 试用活动结束后的7天内; 4、申请要求: 每个实验室只能申请 1 次; 5、其他说明: 无;
图文详情
产品属性
试用体验
产品简介
CCK试剂盒是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)(图1-2) ,其颜色的深浅与存活细胞数目成正比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,可以间接反应活细胞的数量。
CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
图1. WST-8和WST-8甲攒结构图
图2. CCK-8检测细胞活性原理
货号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品包装 | 价格 |
HB-CCK8-1 | CCK8细胞增殖试剂盒 | 100次 | 1ml | 188元 |
HB-CCK8-2 | CCK8细胞增殖试剂盒 | 500次 | 5ml | 625元 |
HB-CCK8-3 | CCK8细胞增殖试剂盒 | 1000次 | 10ml | 1125元 |
HB-CCK8-4 | CCK8细胞增殖试剂盒 | 3000次 | 30ml | 2500元 |
HB-CCK8-5 | CCK8细胞增殖试剂盒 | 10000次 | 100ml | 6250元 |
产品优势
表1 CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
检测方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK法 |
甲臜产物的水溶性 | 差(需加有机溶剂溶解后再检测) | 好 | 好 | 好 |
产品性状 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 现配现用 | 即开即用 | 即开即用 |
检测灵敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
检测时间 | 较长 | 较短 | 较短 | 最短 |
检测波长 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
细胞毒性 | 高,细胞形态完全消失 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 |
试剂稳定性 | 一般 | 较差 | 一般 | 很好 |
批量样品检测 | 可以 | 非常适合 | 非常适合 | 非常适合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
2、本试剂盒细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。
毒性测试
1、在96孔板中配置100 μl的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2、向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4、向每孔加入10 μl CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
注:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100 μl/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃, 5% CO2)。
2、向每孔加入10 μl CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl 0.1 M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
注意事项
1)建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
2)有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。
3)白细胞可能需要培养较长时间。
4)当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
5)如果没有450 nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450 nm滤光片的检测灵敏度高。
6)培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
活力计算:
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注:申请后无特殊情况7天工作日内发货
产品属性
保存条件:-20度冻存
产地:上海
货号:HB-sj20T
品牌:汉恒生物
试用体验
lich******cess 2023-09-03
申请试用的原因:
试用 研究方向: 分子生物学
试用建议及意见:
试用产品情况:非常好
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):简单好用
实验结果:满意
后续是否有购买需求:有
dxy_****d2o9 2023-08-14
申请试用的原因:
研究需要。未来将会在发表的论文上注明试剂来自丁香园^_^
试用建议及意见:
试用产品情况:产品的数值可靠,随样品的变化而显色,且较快速
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):试用装一支的量只够用四个孔,量不足
实验结果:还可以,误差较少
后续是否有购买需求:有
wei*****521 2023-08-09
申请试用的原因:
想试用一下,看看效果 研究方向: 索拉非尼耐药
试用建议及意见:
试用产品情况:使用cck8做了2次药物ic50检测
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):比之前用的mtt试剂要简单
实验结果:结果不错
后续是否有购买需求:有
查看更多