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文献和实验
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供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
库存 :532
靶点 :His
级别 :多克隆
目录编号 :WE0351
克隆性 :多克隆
保质期 :二年
抗体英文名 :Anti His-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
抗体名 :抗His标签多克隆多克隆抗体
宿主 :兔
免疫原 :重组His标签
亚型 :和纯化兔IgG
形态 :液体
应用范围 :WB,ELISA
浓度 :1mg/ml
保存条件 :-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")抗His标签多克隆抗体促销,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:抗His标签多克隆抗体促销
编号:WE0351
英文名:Anti His-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
除抗His标签多克隆抗体促销外,我公司正在打折促销以下产品:
·尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
编号:WE0115
英文名称:Uracil-N-Glycosylase(UNG)
规格:200U|1000U
尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)也称为尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶),通过大肠杆菌表达纯化的重组酶,该蛋白分子量为25kD,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶,并且对RNA无活性,主要应用于防止PCR扩增产物的污染。该酶作用机理为:在PCR反应中以dUTP代替dTTP,扩增产物片段中的T全部被U取代,形成了含dU碱基的PCR扩增产物。UNG酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解反应体系中含U的DNA,有效消除PCR产物的残留污染,大大降低扩增产物污染导致的假阳性,从而保证扩增的特异性和准确性。
活性定义:37℃,60分钟内催化1 nmol尿嘧啶,从含尿嘧啶的DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。
质量控制:SDS-PAGE检测纯度大于95%;经检测无核酸内、外切酶活性。
注意事项:
1、UNG长期储存(非频繁使用; 每月少于3次)请置于-70℃保存,每天或每周使用请于-20℃保存。尽量避免反复冻融,大包装建议分装使用。
2、UNG可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子,一个实验室必须在所有的PCR反应中使用dUTP作为dNTP之一,使所有扩增产物都成为U-DNA。如单使用于某个检测,T-DNA仍会积累,此抗污染系统也难以起到完全的作用。
3、UNG/dUTP系统是PCR试剂内部的一种防污染措施,为了防止PCR产物的污染,尤其是在临检实验室中反复放大同一片段时,必须严格规范实验室的划分和操作。
使用方法:
以下举例为Taq反应体系防止PCR产物污染的使用方法,实际应用可应根据具体实验进行改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
Taq PCR Buffer,10× | 5μl | 1× |
dATP,10 mM | 1μl | 200μM |
dGTP,10 mM | 1μl | 200μM |
dCTP,10 mM | 1μl | 200μM |
dTTP,10 mM | 0.5μl | 100μM |
dUTP,10 mM | 1μl | 200μM |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | Xμl | |
Taq DNA Polymerase,5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
Uracil-N-Glycosylase,1 U/μl | 0.2μl | 0.2 U/50μl |
ddH2O | up to 50μl |
2、反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
UNG消化 | 37℃-50℃ | 5-10 min | |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 30-40个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 1 kb/min | |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:通常将Taq酶与UNG酶按一定的比例加入PCR反应体系中,先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟,然后95℃ 10分钟灭活,(同时这一步也达到预变性和热启动的效果),随后进行PCR扩增。UNG酶的反应可以在37℃-50℃,5-10分钟的范围内变化,可以根据实验的需要进行调整。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
抗His标签多克隆抗体促销关键词:His抗体,WE0351,抗His标签多克隆抗体,重组His标签抗体,兔抗重组His标签
ARB12962 小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)定量分析 Mouse angiotension Ⅱ,ang-Ⅱ ELISA KIT
E0501 抗凝驴血(无菌 pet瓶装)
ARB13096 小鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2(M-AChRM2)elisa检测操作说明书 Mouse muscarinic acetylcholine receptor m2,m-achrm2 ELISA KIT
BTN60910 非冻型血液DNA保存液 Blood DNALOCKER
BTN80801 柱式拭子DNAOUT Column Swab DNAOUT
9032-75-1 PectolyaseY-23 果胶酶Y-23
多聚半乳糖醛酸 D-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride 25990-10-7
PY02-040 SCDLP液体培养基 250克
巴氏染色液(EA65) Papanicolaou EA65 4×100ml|4×500ml
FMOC-L-丝*酸 PCNB 73724-45-5
ARB10177 人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA检测服务 Human α1-antitrypsin,α1-at ELISA KIT
F050301 兔IgG抗体 Rabbit IgG
BTN80917 一步法96孔板质粒DNAOUT(离心法) One-Step 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
ARB11578 人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)代做ELISA实验 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,timp-2 ELISA KIT
SJ0784 延胡索酸
BTN131230 DNase I干粉 DNase I Powder
HC0311 Biohit大容量电动移液器
F050304 山羊IgG抗体 Goat IgG
BL1378 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)
D2000 plus II DNA ladder 100次
66-22-8 Uracil 尿嘧啶
BL0928 RBITC标记羊抗牛IgG抗体
抗His标签多克隆抗体促销关键词:His抗体,WE0351,抗His标签多克隆抗体,重组His标签抗体,兔抗重组His标签
·新型植物基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0174
英文名称:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA,并可最大限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/*仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 | 200次 |
Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
Buffer LP3(浓缩液) | 21ml | 84ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
Buffer GE | 15ml | 60ml |
RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),涡旋振荡1分钟,室温放置10分钟,使其充分裂解。
注意:
1)使用涡旋振荡或移液器吹打,充分裂解组织,组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2,混匀,涡旋震荡1分钟。
4、12000rpm(~~13400×g)离心5分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇),充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
注意:加入Buffer LP3后应立即混匀,可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入500μl无水乙醇,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7.
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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