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文献和实验
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提供商 ：汉恒生物科技（上海）有限公司
服务名称 ：病毒包装
慢病毒包装
产品简介
慢病毒（Lentivirus）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。
慢病毒特点
1.感染范围广。慢病毒可有效感染分裂和非分裂细胞，适合几乎所有细胞系，如神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等2.可稳定表达。慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上，不随着细胞的分裂传代而丢失，可实现目的基因的长时间稳定表达
3.操作安全性高。慢病毒采用的是自失活复制缺陷型病毒株，保障操作安全
整体实验流程
（一） 实验流程（1、2、3为并列步骤）
1. 慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，采用PCR技术(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（cDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
2. 慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体。
3. miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。
4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒（两质粒包装系统），三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染293T细胞，转染后6 h 更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
（二）流程图
汉恒服务项目
汉恒生物科技（上海）有限公司提供慢病毒载体构建、RNAi(shRNA)、miRNA sponge／antago慢病毒、circRNA /LncRNA、CRISPR/Cas9慢病毒定制、慢病毒稳定株筛选、慢病毒现货、过表达和干扰慢病毒过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。
提供产品
质量标准
汉恒优势：
1、专注提供病毒包装服务十余年
2、上万篇SCI期刊引用，包括CELL、Science等
3、一年有10000+客户和汉恒合作，项目经验10W+
4、ISO9001认证的质量体系，严格的病毒纯化工艺
5、以客户为中心的强大售后服务体系，准时交付率连续三年超98%
6、完善的客户服务体系，技术支持、项目跟进、售后服务获得客户一致好评，确保您订购无忧
慢病毒感染实例：
汉恒生物科技（上海）有限公司
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钻石会员
入驻年限：15年
