T4 DNA ligase

库存 ：200

英文名 ：T4 DNA ligase

供应商 ：武汉爱博泰克生物科技有限公司

规格 ： 16000 U

产品信息

产品描述
T4 DNA Ligase (T4 DNA连接酶)，可催化双链DNA或RNA的5’-磷酸与3’-羟基之间形成磷酸二酯键，该催化反应需ATP作为辅助因子。该酶可以催化粘性末端分子间或平末端分子间的连接，也能修复双链DNA或DNA-RNA杂交双链上的单链DNA切口，同时T4 DNA连接酶会封闭这些DNA底物的缝隙。
本品适用于限制性内切酶酶切片段、Linker或Adapter等的连接，也可以用于切刻修复及Ligase介导的RNA检测。
产品特点

• 应用更多：不仅能够催化平末端和粘性末端形成磷酸二酯键，还能修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交链上单链切割；
• 适用多种样本：包括gDNA/FFPE DNA/cfDNA/ChIP DNA；
• 适用多种类型片段连接：兼容illumina平台Y型接头以及MGI平台Bubble接头片段；
• 严格质控：严格的批次性能与稳定性质控；

产品应用
粘性末端和平末端连接，T/A克隆，dsDNA切刻修复，RNA和DNA连接。
产品保存
-20°C
产品组分

组分	16,000 U	80,000 U
T4 DNA Ligase (400,000 U/mL)	40 μL	200 μL
10X T4 DNA ligase Reaction Buffer	500 μL	500 μL

FAQs

Q1：连接效率低的原因和解决方法？

A1：反应Buffer不合适：选择正确的反应Buffer。

A2：反应体系内无ATP等酶辅因子或Mg2+：使用随酶提供的反应Buffer或向其它兼容的Buffer中加入ATP。含ATP或NAD+的Buffer保存超过1年，其内ATP或NAD+可能会降解，导致连接失败。当补加ATP时，确定补加的是核糖核酸ATP（rATP），而不是脱氧核糖核酸ATP（dATP），因为后者不起作用。

A3：反应时间不足：按说明书推荐孵育时间操作，或者适当延长连接反应时间。

A4：连接反应温度不合适：建议在温控准确的设备中按酶最适反应温度进行反应。

A5：连接酶与酶底物选择不当：根据ABclonal推荐的连接酶选择指南，选择合适的连接酶。

A6：反应体系中盐浓度过高或EDTA含量高：纯化DNA或RNA。

A7：去磷酸化步骤完成后，CIP、BAP或SAP失活不彻底：根据厂家推荐的方法去除去磷酸化酶。

A8：连接末端为单碱基突出末端：提高连接酶使用量，延长反应时间。

A9：连接酶失活：使用经过验证的底物验证酶的活性。