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文献和实验
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实验目的和意义: 建建立一种简单、稳定、可靠的PD动物模型,用于研究PD所造成的多种变化,如脑损害、行为学改变、等一系列病理生理和分子机制。
实验原理:
小鼠:1-甲基-4-苯基-1, 2, 3, 6-四氢吡啶(MPTP)具有特异性的神经毒性,其经单胺氧化酶B催化代谢为MPP+,通过抑制线粒体氧化呼吸链、产生反应氧族和一氧化氮等导致黑质多巴胺能神经元坏死、凋亡,在多种动物中产生类似于PD的症状和病理病变。
大鼠:6-OHDA是神经递质多巴胺的羟基类似物,注射后可被儿茶酚胺类神经元吸收,因此能相对选择性损伤多巴胺能神经元。吸收后可生成大量自由基和醌类,抑制线粒体复合酶的活性,导致黑质内多巴胺神经元被损毁,纹状体的多巴胺含量减少,降低至一定水平就会出现PD类似的症状。
实验仪器: 大鼠立体定位仪、手术刀等外科常规器械、牙科钻、同心套管、微量注射器、注射器、
实验内容与方法:
大鼠:1. Wistar大鼠经腹腔给麻醉药注射麻醉。
2.固定好大鼠,头部切口,剥离骨膜,用牙科钻在颅骨顶钻孔,将右侧NS区定位好坐标,插入自制同心套管。
3. 微量注射器吸6-OHDA溶液4µL注射后留置片刻退出,缝合皮肤。
4. 21天参照Francois的实验方法 (包括行动迟缓实验、抓握实验和尾强直实验记录强直症状的变化、震颤实验)记录帕金森氏病的三大症状.
小鼠:
1. C57BL小鼠,腹腔注射MPTP,连续7d。于第6~7次注射后出现暂时性(2~3h)躯干震额、竖毛、尾巴过伸、动作减少及爬杆试验障碍。
2. 于第6~7次注射后出现暂时性(2~3h)躯干震额、竖毛、尾巴过伸、动作减少及爬杆试验障碍。
(1)实验动物
雄性Wistar大鼠、C57BL小鼠
(2)试剂:
MPTP、6-OHDA、麻醉药,常规试剂公司可以提供,诱导药物需要客户自己购买,或委托我公司代购
服务周期:3周~7周
结果提交:提交实验报告书(实验试剂与设备、实验过程、动物行为学判定、原始数据、或者模型动物等)
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