Circligase

价格： ¥7000

品牌：近岸蛋白(Novoprotein) 品牌认证

货号：M027-01B

产品详情

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规格：50次

CircleLigase是一个热稳定性酶，可以催化具有5'-磷酸基团和3'-羟基基团的单链DNA（ssDNA）分子的环化，该反应不依赖于ATP。该酶可以在没有互补序列存在的情况下，高效催化200nt以内单链DNA分子的环化。

产品特点：

1) 标准反应条件下，不产生线性或环状的嵌合体结构;
2) 环化连接酶可用于微量小片段单链DNA的连接，连接产物可通过滚环复制进行大量富集。

产品用途：
1）产生环状的单链DNA分子，用于滚环复制或者滚环转录的实验研究；
2）产生环状的单链DNA分子，用于RNA聚合酶和RNA聚合酶抑制剂的测定。

检测方法：
1）连接产物经20% 丙烯酰胺/8 M 尿素的PAGE胶检测，线性DNA分子的迁移速度较环状DNA分子快。
2）加入10U核酸外切酶I ( Exo I )，37℃反应45min，线性DNA被消化完全，而环状DNA分子不受外切酶的影响。

保存温度：-20 ℃保存，或- 80℃长期保存。

产品包装（A包装）：

产品组成	体积
Circleligase (100U/μl)	10μl
5×Circleligase Reaction Buﬀer	100μl
50mM Mncl₂	20μl
Circleligase ssDNA Control Oligo (5 pmol/μl)	5μl
ddH₂O	500μl

质量控制：
所有组分经检测均无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶、磷酸酶以及RNA酶活性污染。

活性定义：
60℃条件下，1小时内催化1pmol线性5´-磷酸化的标准63-mer寡核苷转换成抵抗核酸外切酶I的环状结构所需要的酶量定义为1个活性单位。

常用反应体系（20μl）：