产品详情
文献和实验
相关推荐
Small RNA，即小 RNA，是一类大小约 18~40 个碱基的单链小分子 RNA，主要包括 microRNA（miRNA）、piRNA、snoRNA、snRNA、tRNA 等。小 RNA 在细胞内有重要的调控功能，具有作为疾病诊断标记物戒药物靶标的潜力，被广泛研究。
microRNA（miRNA）属于small ncRNAs，是单链的短RNA，长度在22nt左右。microRNA是基因表达的主要调控分子，以序列互补的方式与特意靶mRNA结合，通过降解靶mRNA或抑制其蛋白翻译调控靶基因的表达。microRNA不但在基本的生物过程，如发育，应激反应，代谢和基因组完整性维持等方面有基本而且重要的调控作用。在疾病的发生发展全过程中也发挥着重要的调控作用。
一：实验流程
1. 样品RNA 抽提
a. 实验对象为组织样品，取适量（50-100mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，使用BioPulverizerTM冰冻粉碎组织，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（Invitrogen），使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。
b. 实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（样品为贴壁细胞，每10cm2培养皿Trizol使用量为1ml），裂解后抽提RNA。
2. RNA 质量检测
a. 使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值，以计算浓度并评估纯度。
b. 用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA 纯度及完整性。
c. 提供RNA QC报告。
注意：用于芯片检测的RNA 样品，必须是高质量的，完整的，没有RNase污染（降解的样品不能用于标记和芯片检测），没有基因组污染。
3. 制备荧光标记探针
采用miRCURY™ Array Power 标记试剂盒，用标记酶将Hy3™或Hy5™荧光基团标记miRNA,可以得到用于与芯片杂交的荧光探针。
4. 芯片杂交
在标准条件下使用PhalanxTM的热收缩杂交袋将标记好的探针和miRCURY™芯片杂交。
5. 图像采集和数据分析
使用GenePix 4000B 芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度，并将实验结果转换成数字型数据保存，使用配套软件对原始数据进行分析运算。
6. 提供实验报告
包括详细的实验方法和芯片实验数据和图表
microRNA（miRNA）属于small ncRNAs，是单链的短RNA，长度在22nt左右。microRNA是基因表达的主要调控分子，以序列互补的方式与特意靶mRNA结合，通过降解靶mRNA或抑制其蛋白翻译调控靶基因的表达。microRNA不但在基本的生物过程，如发育，应激反应，代谢和基因组完整性维持等方面有基本而且重要的调控作用。在疾病的发生发展全过程中也发挥着重要的调控作用。
一：实验流程
1. 样品RNA 抽提
a. 实验对象为组织样品，取适量（50-100mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，使用BioPulverizerTM冰冻粉碎组织，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（Invitrogen），使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。
b. 实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（样品为贴壁细胞，每10cm2培养皿Trizol使用量为1ml），裂解后抽提RNA。
2. RNA 质量检测
a. 使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值，以计算浓度并评估纯度。
b. 用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA 纯度及完整性。
c. 提供RNA QC报告。
注意：用于芯片检测的RNA 样品，必须是高质量的，完整的，没有RNase污染（降解的样品不能用于标记和芯片检测），没有基因组污染。
3. 制备荧光标记探针
采用miRCURY™ Array Power 标记试剂盒，用标记酶将Hy3™或Hy5™荧光基团标记miRNA,可以得到用于与芯片杂交的荧光探针。
4. 芯片杂交
在标准条件下使用PhalanxTM的热收缩杂交袋将标记好的探针和miRCURY™芯片杂交。
5. 图像采集和数据分析
使用GenePix 4000B 芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度，并将实验结果转换成数字型数据保存，使用配套软件对原始数据进行分析运算。
6. 提供实验报告
包括详细的实验方法和芯片实验数据和图表
深圳市拓普生物科技有限公司
实名认证
皇冠会员
入驻年限：7年
