人喉癌细胞 TU212

生长状态 ： 贴壁生长

规格 ：5×105

人喉癌细胞 TU212产品说明
种属来源:    人
组织来源:    喉
疾病特征:    喉癌
细胞形态:    上皮细胞样
生长特性:    贴壁生长
培养基:    DMEM培养基，90%；FBS，10%。
生长条件:    气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 
传代方法:    1：2至1：6，每周2次。
冻存条件:    90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测:    阴性
人喉癌细胞 TU212细胞培养常见注意事项：
1、收货时，如不能在收到细胞后及时操作处理细胞，T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，需即刻复苏细胞；T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上，再开始处理细胞，平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、贴壁细胞在消化时，因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样，不能完全规定消化时间，以科研人员经验为准。 对于消化这步，如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议可以按照下述操作：胰酶首先复温到室温后加入细胞，然后每隔30秒，即吹打下细胞，如果能够吹打散细胞，加入完全培养基终止消化，把细胞打散后，离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。注意消化时间，不要过度，细胞变圆可以吹下来即可终止。
3、传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代；传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险；细胞状态不好或者生长比较慢时，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度；细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效改善；建议不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化，也可以联系咨询我们。
4、细胞冻存时，部分长得比较慢的细胞，冻存的细胞密度要稍微大点，以防止复苏后生长困难；冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO，同时浓度不要太高，部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡，所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度；冻存时建议设置冻存检测，即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中，与正常体积冻存的细胞共同冻存，至液氮后复苏检查冻存结果，冻检合格前，留一部分细胞继续培养，以防万一；细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则，即冻存时温度不能急剧下降，应控制温度缓慢下降，复苏时应快速融化，融化后尽快加入培养基中。