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供应商 :深圳子科生物科技有限公司
重组蛋白A/G预装柱/填料技术指标:每毫升rProtein A/G结合35~50mg人血清IgG,38-51mg兔IgG /ml填料,5.5-18.5mg鼠血清IgG/ml填料,4.5-17.8mg鼠腹水IgG/ml填料
一、 产品简介
通过基因重组技术,将蛋白A与蛋白G基因重组于同一质粒载体中,并在大肠杆菌中进行表达,得到分子量为50.5KDa的可溶性蛋白A/G。该可溶性蛋白A/G具有四个IgG结合位点,来自于蛋白A;和两个IgG的结合位点,来自于蛋白G。因具有上述特性,使得基因工程重组蛋白A/G具有广泛的IgG的结合能力,对各种哺乳类动物的IgG都能结合,使得该产品在IgG的诊断和纯化中具有十分广泛的用途。
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术,将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化,使得单位体积中结合更多蛋白A/G,产品最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白A或蛋白G、蛋白A/G偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化,或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。
二、重组蛋白A/G预装柱/填料
目录号 | 规格(ml) | 备注说明 |
PAG000001 | 1 | 手动 |
PAG000005 | 5 | 手动 |
PAG100001 | 1 | 自动 |
PAG100005 | 5 | 自动 |
目录号 | 规格(ml) |
PAG001005 | 5 |
PAG001025 | 25 |
PAG001100 | 100 |
三、 重组蛋白A/G预装柱/填料产品技术指标
rec-Protein A/G per Sepharose 4FF 比值:4.0-4.5mg rec-Protein A/G per ml Sepharose 4FF
rec-Protein AG分子量:50.5 KDa
每分子rec-Protein G可结合IgG位点数:6个(4个来自于蛋白A,2个来自于蛋白G)
rec-Protein A可结合白蛋白位点数:无
线性流速:300-500 cm/h
耐压指数:≤0.3 MPa(填料)
l 、注意事项
请在实验前仔细阅读本rProtein A预装柱使用说明。同时,将所要的所有试剂、耗材拿出置于室温,恢复至室温使用。
2、 产品保存
产品储存于2-8℃,保质期两年。
3、 rProtein A/G-Sepharose 4FF纯化IgG抗体步骤
以下方法适用于从血清或腹水中纯化IgG抗体,不同来源的IgG与rProteinA/ G的结合能力不同,具体情况请参考表1。
1. 将血清或腹水样品(推荐上样量2 mL样品/mL柱)装入截留分子量3.5 KDa透析带中,于4 ℃冰箱中对1× PBS(pH 7.4)透析过夜;
2. 将rProtein A/G-Sepharose 4FF装柱固定好,用10倍柱体积1× PBS(pH 7.4)平衡层析柱,建议流速为1 mL/min;
3. 将透析好的样品从层析柱上端加入,建议流速为1 mL/min,为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样,重复2遍(或者是将样品1次性加入层析柱后置于摇床上,轻轻摇动,结合30 min);
4. 样品结合后,用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱,建议流速为1 mL/min,勿让层析柱滴干;
5. 洗脱IgG,向层析柱上端加入洗脱液(100 mM甘氨酸,pH 2.7),用预先加有100 μL中和缓冲液(1M Tris,pH 9.0)的4 mL Ep管接收,2 mL /管,共收集10倍柱体积,进行10 % SDS-PAGE电泳,确定IgG样品所在管,回收样品。
6. 加入5倍柱体积再生缓冲液(100 mM甘氨酸,pH 2.0),再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。 向层析柱加入10倍柱体积, 20% Ethanol,于4~8 ℃冰箱。
重组蛋白A/G预装柱/填料其他产品:500ml过滤上杯 Filter Upper Cups 0.10µm 500ml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.10µm 500ml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,Nylon 尼龙膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,CA 醋酸纤维膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,SFCA,无表面活性剂醋酸纤维膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 500ml,MCE 混纤膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,Nylon 尼龙膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,CA 醋酸纤维膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,SFCA,无表面活性剂醋酸纤维膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.45µm 500ml,MCE 混纤膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包,24只/箱
1L 过滤器上杯 1LFilter Upper Cups 0.10µm 1000mlml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.10µm 1000mlml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包,24只/箱
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0.22µm 1000mlml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包,24只/箱
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0.22µm 1000ml,CA 醋酸纤维膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包,24只/箱
0.22µm 1000ml,SFCA,无表面活性剂醋酸纤维膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包,24只/箱
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接收瓶 Reservoir Bottles 150ml 聚苯乙烯材料,耐烯酸,已消毒 1只/包,24只/箱
250ml 聚苯乙烯材料,耐烯酸,已消毒 1只/包,24只/箱
500ml 聚苯乙烯材料,耐烯酸,已消毒 1只/包,24只/箱
1000ml 聚苯乙烯材料,耐烯酸,已消毒 1只/包,24只/箱
酶标板 ELISA Plates 96孔 高结合力不可拆,300~400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 高结合力可拆,配8孔条,300~400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 高结合力可拆,配12孔条,300~400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
48孔 高结合力可拆,配12孔条,300~400ng/cm2 10块/袋,400块/箱
96孔 中结合力不可拆,200~300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 中结合力可拆,配8孔条,200~300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 中结合力可拆,配12孔条,200~300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
48孔 中结合力可拆,配12孔条,200~300ng/cm2 10块/袋,400块/箱
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